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PJ34 (hydrochloride)

MCE 国际站：PJ34 (hydrochloride)

CAS：344458-15-7

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：4°C, sealed storage, away from moisture

生物活性：PJ34 hydrochloride 是 PARP1/2 的抑制剂，IC₅₀ 分别为 110 nM 和 86 nM。 IC50 和目标：IC50：110 nM (PARP1)，86 nM (PARP2)^[1]体外： PJ34 抑制 PARP 酶活性IC₅₀ 为 110±1.9 nM。为了比较其他 PARP 抑制剂在 PC12 细胞中的神经保护特性，使用 LDH 测定法评估 PJ34。在 10^-7 到 10^-5 M^[1] 的浓度范围内，PJ34 处理也显着且浓度依赖性地减弱细胞死亡。体内为了与其他 PARP 抑制剂比较效力和功效，分别在 3.2 和 10 mg/kg 的剂量下评估 PJ34。剂量为 3.2 mg/kg 的 PJ34 显着减少了 33% 的皮质损伤；然而，10 mg/kg 的剂量显示出相反的效果（减少 17%）^[1]。 PJ34 (25 mg/kg) 将缺血动物中的 TNF-α mRNA 水平降低 70%，并且这些值在处理过的小鼠中与假动物或幼稚动物没有差异。与载体处理的缺血小鼠相比，用 PJ34 处理缺血小鼠的 E-选择素 mRNA 水平降低了 81%，ICAM-1 mRNA 水平降低了 54%^[2]。

体外：PJ34 抑制 PARP 酶活性，IC₅₀ 为 110±1.9 nM。为了比较其他 PARP 抑制剂在 PC12 细胞中的神经保护特性，使用 LDH 测定法评估 PJ34。在 10^-7 到 10^-5 M^[1] 的浓度范围内，PJ34 处理也显着且浓度依赖性地减弱细胞死亡。

体内：为了与其他 PARP 抑制剂比较效力和功效，分别在 3.2 和 10 mg/kg 的剂量下评估 PJ34。剂量为 3.2 mg/kg 的 PJ34 显着减少了 33% 的皮质损伤；然而，10 mg/kg 的剂量显示出相反的效果（减少 17%）^[1]。 PJ34 (25 mg/kg) 将缺血动物中的 TNF-α mRNA 水平降低 70%，并且这些值在处理过的小鼠中与假动物或幼稚动物没有差异。与载体处理的缺血小鼠相比，用 PJ34 处理缺血小鼠的 E-选择素 mRNA 水平降低了 81%，ICAM-1 mRNA 水平降低了 54%^[2]。

激酶试验：为了评估 FR247304、3-AB 和 PJ34 的 PARP-1 或 PARP-2 抑制活性，对 PARP 活性进行了较小的修改来评估。 PARP 酶测定的最终体积为 100 μL，由 50 mM Tris-HCl (pH 8.0)、25 mM MgCl2、1 mM 二硫苏糖醇、10 μg 活化鲑鱼精子 DNA、0.1 μCi [腺苷酸-32P]NAD、用于 PARP-1 测定的 0.2 单位重组人 PARP 或用于 PARP-2 测定的 0.1 单位重组小鼠 PARP-2，以及各种浓度的 FR261529 或 3-AB。反应混合物在室温（23°C）下孵育15分钟，加入200μL冰冷的20%三氯乙酸（TCA）终止反应，并在4°C下孵育10分钟。将沉淀转移到GF/B过滤器上并用10% TCA溶液和70%乙醇洗涤3次。过滤器干燥后，通过液体闪烁计数测定放射性。

细胞试验：培养的 PC12 细胞在补充有 5% (v/v) 胎牛血清、5% (v/v) 马血清和 1% (v/v) 青霉素-链霉素抗生素混合物的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基中生长。细胞在 37°C、95% 空气和 5% CO2 的气氛中生长。对于所有实验，细胞以 4×104 个细胞/孔的密度接种在 96 孔培养板中，并贴壁过夜。为了评估细胞活力，使用 LDH 检测试剂盒通过标准测量 LDH 释放来量化过氧化氢诱导的细胞毒性。简而言之，过氧化氢暴露后6小时，每孔收集20μL培养基，加入LDH测定试剂盒制备的溶液。室温孵育 30 分钟后，通过添加 1 N HCl 终止反应，并使用酶标仪在 450 nm 处测量吸光度。

动物体内实验:大鼠[1] 对于短暂性局灶性缺血，使用 9 至 10 周龄的雄性 Wistar 大鼠（体重 274-380 g）。 FR247304、PJ34或3-AB悬浮于0.5%甲基纤维素中，FR247304的给药剂量为10和32mg/kg，PJ34的剂量为3.2和10mg/kg，或3-AB的剂量为32和100mg/kg。 AB 腹膜内注射两次，分别在 MCA 闭塞前 10 分钟和再循环前 10 分钟进行。将给药体积调整为2mL/kg。小鼠[2] 使用雄性瑞士白化小鼠（27-32 克）。将 PARP 抑制剂 PJ34（1.25、12.5 或 25 mg/kg）溶解在等渗盐水（NaCl，0.9%）中，并以 10 mL/kg 的体积在缺血前 15 分钟和缺血后 4 小时腹膜内注射缺血。给予对照缺血小鼠和假手术动物载体（盐水）。研究中还包括幼稚动物。

研究领域：Cell Cycle/DNA Damage | Epigenetics

作用靶点：PARP

参考文献：

[1]. Haddad M, et al. Anti-inflammatory effects of PJ34, a poly(ADP-ribose) polymerase inhibitor, in transient focal cerebral ischemia in mice. Br J Pharmacol. 2006 Sep;149(1):23-30.[2]. Iwashita A, et al. A novel ａnd potent poly(ADP-ribose) polymerase-1 inhibitor, FR247304 (5-chloro-2-[3-(4-phenyl-3,6-dihydro-1(2H)-pyridinyl)propyl]-4(3H)-quinazoli), attenuates neuronal damage in in vitro ａnd in vivo models of cerebral ischemia. J Ph[3]. Diani-Moore S, et al. NAD+ loss, a new player in AhR biology: prevention of thymus atrophy ａnd hepatosteatosis by NAD+ repletion. Sci Rep. 2017 May 23;7(1):2268.