提供者：武汉博欧特生物科技有限公司 发布时间：2015/11/10 10:04:18 阅读次数：575次 进入该公司店铺
1．连接前先电泳确定待连接载体与片段的浓度，载体与片段的摩尔比为1∶3-5。
2．在离心管中加入如下成分：
10×连接Buffer 1μl
待连接的样品PCR产物+载体8.5μl
NEB T4连接酶 0.5μl
如果连接粘性末端，16度连接2h至过夜，如果连接平性末端，最好16度连接6h以上（具体连接时间可根据具体实验进行调整）。
3．可以同时设立不加插入片段的对照，以测定假阳性背景（选做）。
4．转化之前无须将连接酶灭活，可取5μl连接产物直接转化，余下的-20度保存。
关键词：抗体 蛋白 ELISA试剂盒
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