提供者：武汉博欧特生物科技有限公司 发布时间：2015/10/20 9:42:19 阅读次数：526次 进入该公司店铺
1．酶切前确定待切样品的浓度，并选择合适的限制性内切酶和配套Buffer（可选用二者活性都较高的Buffer 或者通用Buffer）。
2．按下列反应体系混匀样品，并短暂离心使样品沉于管底（该体系可根据载体或PCR产物的浓度进行调整，但必须确保酶量小于或等于总体积的1/10）。
载体双酶切：
酶1 2.5μl
酶2 2.5μl
Buffer(10x) 10μl
载体 6μl
H2O 79μl
PCR产物双酶切：
酶1 2.5μl
酶2 2.5μl
Buffer(10x) 10μl
PCR产物 12μl
H2O 73μl
各分装成50μl一管进行酶切。
3．将离心管置于37℃中温育4h左右（该条件可根据酶的活性温度及时间进行调整）。
4．用未酶切的质粒作为对照，琼脂糖电泳鉴定质粒酶切结果。
关键词：抗体 蛋白 ELISA试剂盒 PCR酶切
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