简介

上海哈灵生物科技有限公司提供的美国ZYMED公司SP系列试剂盒，全称为过氧化物酶标记的链霉卵白素染色试剂盒。该方法由美国ZYMED公司于1986年首建。由于链霉卵白素的分子量是60kDa，有四个亚基可和生物素结合，等电点为6.5，所以该方法具有灵敏度高、特异性强、背景清晰、成本低廉的优点，是理想的免疫组化染色方法。

试剂盒内容

试剂（无色液体）：3%H2O2去离子水 3ml、6ml或18ml

试剂A（蓝色液体）：封闭用正常山羊血清工作液 3ml、6ml或18ml

试剂B（黄色液体）：生物素化二抗工作液（IgG/Bio） 3ml、6ml或18ml

SP-0022：生物素标记山羊抗兔、大鼠、和豚鼠 IgG

SP-0023：生物素标记山羊抗兔 IgG

SP-0024：生物素标记山羊抗小鼠 IgG

试剂C（橙色液体）:辣根酶标记链霉卵白素工作液（S-A/HRP）3ml、6ml或18ml

标本染色

1、石蜡切片，常规脱蜡至水。

2、蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟（如需采用抗原修复，在此步骤后进行）。

3、3%H2O2去离子水（无色液体）孵育15-20分钟，以消除内源性过氧化物酶活性。

4、滴加试剂A（蓝色液体）室温孵育15-20分钟，倾去，勿洗

5、滴加适当比例稀释的一抗，37℃孵育2-3小时或4℃过夜

6、PBS冲洗，3分钟×3次

7、滴加试剂B（黄色液体），室温或37℃孵育15-20分钟

8、PBS冲洗，3分钟×3次

9、滴加试剂C（橙色液体），室温37℃孵育15-20分钟

10、PBS冲洗，3分钟×3次

11、显色剂显色（DAB或AEC）

12、自来水充分冲洗

13、如果需要，可进行复染，脱水，透明

14、选择适当的封片剂封片

保存方法：2-8℃避光保存。