产品介绍

AF430-NPL是将从水仙鳞茎中天然提取的Narcissus Pseudonarcissus凝集素（NPL），与Alexa Fluor430荧光染料通过经典NHS-酯氨基偶联技术制备而成的糖链特异性长斯托克斯位移荧光标记科研试剂。它完整保留了水仙凝集素对高甘露糖型寡糖链、末端α-D-甘露糖残基的高亲和力识别特性，同时引入AF430染料激发-发射峰间隔大的独特光学性能，全程严格控制偶联反应的pH条件与染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未结合的游离AF430染料，解决了常规短波长荧光凝集素斯托克斯位移小、激发光散射严重干扰成像信号的痛点。试剂以稳定的淡黄色至黄绿色冻干粉末形式提供，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是糖生物学研究中430nm激发通道下高甘露糖糖链低背景示踪的高可靠性特色工具。

基础参数

中文名称：Alexa Fluor430标记水仙凝集素，AF430-水仙凝集素

英文名称：AF 430 NPL，AF430-NPL，Alexa Fluor430-NPL，Alexa Fluor430-Narcissus Pseudonarcissus Lectin

外观状态：淡黄色至黄绿色冻干粉末

荧光光谱参数：激发波长约430 nm，发射波长约545 nm

储存条件：-20℃以下避光密封干燥保存，避免反复冻融，复溶后4℃环境下可短期放置1周，操作过程中全程严格避光，防止AF430荧光染料发生光漂白降解

用途：高甘露糖糖链低背景荧光标记，蓝光激发通道大位移成像，复杂样本糖基化表型分析

作用机理

AF430-NPL中的水仙凝集素蛋白以天然活性二聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中含末端α-1,3或α-1,6连接甘露糖残基的高甘露糖型寡糖链，对高甘露糖结构的亲和力远高于普通单甘露糖分子。共价偶联在蛋白表面赖氨酸残基上的AF430荧光基团，在430nm蓝光光源激发下可发射出明亮的545nm绿色荧光，其斯托克斯位移超过100nm，激发光与发射光的波长间隔极大，几乎完全规避了常规短波长荧光染料常见的激发光散射串扰问题，直接将凝集素的糖链识别信号转化为低背景的绿色荧光信号，无需二次孵育等复杂操作，一步孵育即可完成靶标高甘露糖糖链的原位标记，整个过程不会破坏凝集素的天然糖结合活性，也不会对样本的基础细胞结构造成明显影响。

应用领域

AF430-NPL可用于高甘露糖糖链低背景荧光标记，对自发荧光较强的固定组织切片进行一步孵育标记，清晰呈现样本中高甘露糖型糖蛋白的精细分布模式，有效规避样本自发荧光的干扰。该试剂可应用于蓝光激发通道大位移成像，依托常规荧光显微镜标配的430nm蓝光激发模块，无需升级特殊硬件即可获得高清晰度的低背景荧光图像，大幅降低复杂样本的成像门槛。同时它也适用于复杂样本糖基化表型分析，在细胞裂解物、石蜡组织切片等背景干扰较强的样本体系中，定量不同处理组之间高甘露糖糖链的表达差异，为复杂生物样本的糖生物学研究提供稳定可靠的特色工具。

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