猪流感抗体（FLU-Ab）ELISA试剂盒使用说明书_产品说明_仪器仪表技术文献

猪流感抗体（FLU-Ab）ELISA试剂盒使用说明书

提供者：上海雅吉生物科技有限公司发布时间：2024/10/14 10:11:33 阅读次数：2714次进入该公司店铺

商家名片

周*

请说明是阿仪网看到我的，谢谢!

公司:上海雅吉生物科技有限公司
电话:15******058
手机:15******058
微信:***
交换名片后展示联系方式

交换名片

本试剂盒仅供研究使用。
96T

使用目的：
本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中流感抗体（FLU-Ab）表达。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猪流感抗体（FLU-Ab）表达。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中流感抗体（FLU-Ab）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪流感抗体（FLU-Ab）的存在与否。
试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	阳性对照	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	阴性对照	0.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1个

标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能猪上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤

编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30后弃去，如此重复5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
温育：操作同3。
洗涤：操作同5。
显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.20
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品OD值<临界值（CUT OFF）者为流感抗体（FLU-Ab）阴性
阳性判定：样品OD值≥临界值（CUT OFF）者为流感抗体（FLU-Ab）阳性。
注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。