交换名片

NU 7026

MCE 国际站：NU 7026

CAS：154447-35-5

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：NU 7026 (LY293646) 是一种新型特异性 DNA-PK 抑制剂，IC₅₀ 为 0.23 μM，也抑制 PI3KIC₅₀ 为 13 μM。 IC50 和目标：IC50：0.23±0.01 μM (DNA-PK)，13±3 μM (PI3K)^[1]体外： NU7026 (10 μM) 增强电离辐射 (IR) 细胞毒性 [90% 细胞杀伤时的增强因子 (PF₉₀)=1.51±0.04] 在指数生长的 DNA-PK 熟练但不缺陷的细胞中^[1]。 NU7026 协同使 I83 细胞对苯丁酸氮芥 (CLB) 敏感 3.5 倍^[2]。NU7026 是一种新型 DNA 修复酶 DNA 依赖性蛋白激酶 (DNA-PK) 抑制剂。在 10 μM 的剂量下，本身对细胞无毒，需要至少 4 小时的 NU7026 暴露和 3 Gy 辐射才能对 CH1 人卵巢癌细胞产生显着的放射增敏作用^[3].
溶液体外：NU7026溶于无水DMSO。将 NU7026 添加到细胞中，使终浓度为 0.25% DMSO (v/v)^[4]。体内 NU7026，一种新型 DNA 修复酶 DNA 依赖性蛋白激酶 (DNA-PK) 抑制剂。在以 5 mg/kg 静脉内给药于小鼠后，NU7026 经历了快速的血浆清除率 (0.108 L/h)，这主要归因于广泛的代谢。腹膜内 (ip) 和口服给药 20 mg/kg 后的生物利用度分别为 20% 和 15%^[3]。
体内解决方案：
NU7026 由含 10% DMSO 和 5% Tween 20 的盐水（小鼠）（小鼠）^[3] 配制而成。
NU7026 由 10% 乙醇、25% PEG 200 配制而成和 5% 吐温 20 盐水 (iv)^[3]。

体外：NU7026 (10 μM) 增强电离辐射 (IR) 细胞毒性 [90% 细胞杀伤时的增强因子 (PF₉₀)=1.51±0.04] 在指数生长的 DNA-PK 熟练但不缺陷的细胞中^[1]. NU7026 协同使 I83 细胞对苯丁酸氮芥 (CLB) 敏感 3.5 倍^[2]。NU7026 是一种新型 DNA 修复酶 DNA 依赖性蛋白激酶 (DNA-PK) 抑制剂。在 10 μM 的剂量下，本身对细胞无毒，需要至少 4 小时的 NU7026 暴露和 3 Gy 辐射才能对 CH1 人卵巢癌细胞产生显着的放射增敏作用^[3].
溶液体外：NU7026溶于无水DMSO。将 NU7026 添加到细胞中，使终浓度为 0.25% DMSO (v/v)^[4]。

体内：NU7026，一种新型 DNA 修复酶 DNA 依赖性蛋白激酶 (DNA-PK) 抑制剂。在以 5 mg/kg 静脉内给药于小鼠后，NU7026 经历了快速的血浆清除率 (0.108 L/h)，这主要归因于广泛的代谢。腹膜内 (ip) 和口服给药 20 mg/kg 后的生物利用度分别为 20% 和 15%^[3]。
体内解决方案：
NU7026 由含 10% DMSO 和 5% Tween 20 的盐水（小鼠）（小鼠）^[3] 配制而成。
NU7026 由 10% 乙醇、25% PEG 200 配制而成和 5% 吐温 20 盐水 (iv)^[3]。

激酶试验：使用 Q-Sepharose、S-Sepharose 和肝素琼脂糖进行色谱分离后，从 HeLa 细胞核提取物中分离出哺乳动物 DNA-PK (500 ng/μL)。 DNA-PK (250 ng) 活性在 30°C、最终体积 40 μL、含有 25 mM HEPES (pH 7.4)、12.5 mM MgCl2、50 mM KCl、1 mM DTT、10% v/ 的缓冲液中测量v 聚丙烯 96 孔板中的甘油、0.1% w/v NP-40 和 1 mg 底物 GST-p53N66（与谷胱甘肽 S 转移酶融合的人野生型 p53 的 NH2 末端 66 个氨基酸残基）。向测定混合物中添加不同浓度的抑制剂（在 DMSO 中，最终浓度为 1% v/v）。孵育 10 分钟后，添加 ATP 至终浓度 50 μM，以及 30 聚体双链 DNA 寡核苷酸（终浓度 0.5 ng/mL），以启动反应。振荡 1 小时后，向反应液中加入 150 μL PBS，然后将 5 μL 转移至每孔含有 45 μL PBS 的 96 孔不透明白色板中，其中允许 GSTp53N66 底物与孔结合1小时。为了检测 DNA-PK 引发的 p53 丝氨酸 15 残基上的磷酸化事件，在基本 ELISA 程序中使用了 p53 磷酸丝氨酸 15 抗体。然后在 ELISA 中使用抗兔辣根过氧化物酶偶联的二抗，然后添加化学发光试剂以检测通过 TopCount NXT 化学发光计数测量的信号
[1]。

细胞试验：将 I83 细胞接种于含有 10% FBS (1.5×105 cells/mL) 的 RPMI 1640 培养基中，并用媒介物 (DMSO)、5 μM CLB、CLB IC50、10 μM NU7026 或两种药物的组合处理 0、6、 24 和 48 小时。测定细胞周期分布、细胞凋亡、DNA-PK磷酸化和γH2AX测定，并将它们表示为细胞周期各阶段的百分比。 DNA 含量使用配备 CellQuest 软件的 FACSCalibur 流式细胞仪进行分析
[2]。

动物体内实验:小鼠
[3] 使用雌性 BALB/c 小鼠。 NU7026 配制在 10% DMSO 和 5% Tween 20 的生理盐水中，分别以 20 和 50 mg/kg 的腹腔注射和口服 (po) 给药。对于 5 mg/kg 的静脉给药，NU7026 配制在 10% 乙醇、25% PEG 200 和 5% Tween 20 的盐水中。对照动物单独接受载体。每个时间点注射三只小鼠的组。在施用后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6和24小时用氟烷短暂麻醉后通过心脏穿刺收集血液。 1500 g 离心 2 分钟以获得血浆后，将样品储存在 -20°C 直至分析。对于尿液排泄研究，NU7026 以 5 mg/kg 静脉注射给药。尿液在代谢笼中收集 24 小时以上，并储存在 -20°C 直至需要。

研究领域：Cell Cycle/DNA Damage | PI3K/Akt/mTOR | Apoptosis

作用靶点：DNA-PK | Apoptosis

参考文献：
[1]. Veuger SJ, et al. Radiosensitization ａnd DNA repair inhibition by the combined use of novel inhibitors of DNA-dependent protein kinase ａnd poly(ADP-ribose) polymerase-1. Cancer Res. 2003 Sep 15;63(18):6008-15.
[2]. Amrein L, et al. Chlorambucil cytotoxicity in malignant B lymphocytes is synergistically increased by 2-(morpholin-4-yl)-benzo[h]chomen-4-one (NU7026)-mediated inhibition of DNA double-strand break repair via inhibition of DNA-dependent protein kinase. J
[3]. Nutley BP, et al. Preclinical pharmacokinetics ａnd metabolism of a novel prototype DNA-PK inhibitor NU7026. Br J Cancer. 2005 Oct 31;93(9):1011-8.
[4]. Ciszewski WM, et al. Interleukin-4 enhances PARP-dependent DNA repair activity in vitro. J Interferon Cytokine Res. 2014 Sep;34(9):734-40.