HEPENGBIO人体血小板高纯分离试剂盒产品说明书

主要用途

HEPENGBIO人体血小板高纯分离试剂是一种旨在通过等密度离心的方法，直接从人体全血样品中分离出结构完整而高度纯化的血小板组分的方法。适合于人体（生理或病理）血小板的制备。其制备物产量高，活性保证，纯度可达99％。可以被用于凝集试验、功能检测等研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能稳定，分离产量和纯度保证。

技术背景

血小板（platelet），又称为凝血细胞（thrombocytes），是一种小而形状规则的细胞片段，直径2至3微米。其前体为巨核细胞（megakaryocytes），平均生命周期5至9天。血小板在止血过程（hemostasis）中起着重要作用，帮助形成血液凝块，同时也是多种生长因子，包括血小板源生长因子（platelet-derived growth factor）、转化生长因子β（transforming growth factor-β；TGF-β）、碱性纤维原细胞生长因子（basic fibroblast growth factor；bFGF）等的自然来源。体内血小板数量和功能异常会产生血小板病（thrombocytopathy）：血小板过低（thrombocytopenia）或功能降低（thrombasthenia），将导致出血；过高（thrombocytosis）则容易产生血块，而引起中风、心肌梗塞、肺栓塞（embolism）。血小板的分离是现代血液学研究的最常用的手段之一。福特（Ford）等使用等密度介质（1.063克/毫升），通过低速离心，一步从红细胞和白细胞中获得纯度更高、活性保证、结构完整的血小板。

产品内容

HEPENGBIO高纯液（Reagent A）毫升

HEPENGBIO稀释液（Reagent B）毫升

产品说明书1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO高纯液（ReagentA），避免光照；严格无菌操作；6月

用户自备

2毫升离心管：用于样品操作的容器

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

4℃（微型）台式离心机：用于样品操作

实验步骤

1． 准备1个无菌的15毫升锥形离心管

2． 摇匀试剂盒里的HEPENGBIO高纯液（ReagentA）

3． 移出xx毫升HEPENGBIO高纯液（ReagentA）到15毫升锥形离心管

4． 加入xx毫升HEPENGBIO稀释液（ReagentB），混匀——此为HEPENGBIO高纯工作液

5． 小心沿着管壁，在HEPENGBIO高纯工作液上面，一滴一滴加入5毫升新鲜抗凝全血样品

6． 室温下，放进4℃台式离心机离心15分钟，速度为350g（注意：避免使用快速制动）

7． 小心取出离心管：可见上端二分之一处黄色血浆和下端四分之一处红色血细胞之间的混浊血小板样品带

8． 小心抽去血小板样品带以上的血浆液体

9． 小心收集血小板样品带到2毫升离心管（注意：置于血浆和血小板样品带交界处下缘小心缓慢抽吸）——

10． 放进4℃微型台式离心机离心20分钟，速度为2000g

11． 小心抽去上清液

12． （选择步骤）加入xx至xx毫升HEPENGBIO稀释液（ReagentB）

13． （选择步骤）放进微型离心机离心20分钟，速度为2000g

14． （选择步骤）小心抽去上清液

15． 加入xx微升HEPENGBIO稀释液（ReagentB），混匀

16． 放进－70℃冰箱里保存

注意事项

1． 本产品为10次（5毫升全血/次）操作

2． 操作时，避免污染母液，尤其是HEPENGBIO高纯液（ReagentA）

3． 操作时，须戴手套

4． 建议使用新鲜抗凝全血

5． 全血样品采集建议使用EDTA二钾血液抗凝液或ACD血液抗凝液，

6． 建议使用足够的样品量

7． 血小板提取量因人而异；如果不足，建议增加全血量

8． 本产品所获得的线粒体纯度（可达到99％）和产量最为理想

9． 使用HEPENGBIO高纯液（ReagentA）前，须摇匀后加入

10． HEPENGBIO高纯工作液最低使用量为5毫升。大于5毫升血液样品，与HEPENGBIO高纯工作液1：1比例

11． 离心减速时，不得使用制动方式

12． 为了避免红细胞和白细胞污染，抽吸血小板样品带时，留出2至3毫米红细胞与血小板交界处的液体（上图蓝色部分）

13． 每毫升全血平均可获得2 X 10⁸血小板

14． 本公司提供系列血小板试剂产品