HEPENGBIO细胞去甲基化处理试剂盒产品说明书

主要用途

HEPENGBIO细胞去甲基化处理试剂是一种旨在使用DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷诱导细胞基因脱甲基，重新改变染色质结构模型，产生基因组内甲基化缺失状态的技术方法。其适用于动物细胞和人体细胞。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，作用显著。

技术背景

在基因的启动子区域（promotor region）通常存在一些富含重复双核苷酸“CG”的区域，称为“CpG岛”（CpG island）。在人类基因组内，存在有近3万个CpG岛。这些CpG岛不仅是基因的一种标志，而且还参与基因表达的调控和影响染色质的结构，更是DNA甲基化的一位置。5-氮杂-2-脱氧胞苷（5-Aza-2-deoxycytidine；5-aza-cdR或5-aza-dC）是一种脱甲基的氨基乙醇，又称DECITABINE。作用于强力抑制DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase）。其分子式为C8H12N4O4，分子量为228.2。通过去甲基化处理，染色质结构模型重新改变，使转录因子能够结合在启动子上，形成转录复合物，启动基因表达。

产品内容

HEPENGBIO处理液（Reagent A）2毫升

HEPENGBIO清理液（Reagent B） 100毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存HEPENGBIO处理液（Reagent A）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；保存HEPENGBIO清理液（Reagent B）在4℃冰箱里；6月

用户自备

25cm²细胞培养瓶：用于培养细胞的容器

HEPENGBIO DMEM完全细胞培养基：用于细胞培养的营养基

血细胞计数器：用于细胞计量

实验步骤

1． 准备1瓶25cm²细胞培养瓶

2． 接种用户需化学去甲基化的细胞（1 X 10⁵细胞总量）

3． 放进37℃细胞培养箱孵育24小时，或直到细胞生长密度达10％

4． 小心抽去细胞培养液

5． 小心加入3毫升用户自备的完全细胞培养液

6． 小心加入30微升HEPENGBIO处理液（Reagent A）

7． 轻轻摇匀后，放进37℃细胞培养箱孵育24小时

8． 小心抽去含有HEPENGBIO处理液（Reagent A）的细胞培养液

9． 重复实验步骤5至8二次

10． 小心加入3毫升HEPENGBIO清理液（Reagent B），清洗生长中的细胞表面

11． 小心抽去HEPENGBIO清理液（Reagent B）

12． 继续后续操作

注意事项

1． 本产品为20次操作

2． 操作时，须戴手套

3． 操作时，须严格无菌操作

4． 用户可以根据需求，使用不同的培养皿或培养瓶，相应调整试剂用量

5． HEPENGBIO处理液（Reagent A）的使用比例为1：100，即1毫升培养液加入10微升HEPENGBIO处理液（Reagent A）

6． 本公司提供系列甲基化分析试剂产品