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质粒快速小提试剂盒(0.6~3mL)
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详细内容
| 中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
| 质粒快速小提试剂盒(0.6~3mL) | QuickPure Plasmid Mini kit(0.6-3mL) | 200次 | GOY-F9866 |
产品说明书:
| 本试剂盒操作简单快速、提取量高。整个提取过程不过10分钟,不需要离心收集细菌和重悬菌体,直接在培养好的菌液中加入独特的裂解液Buffer L2,随后中和、离心过柱,提取出的质粒可高达30μg,并大限度去除蛋白质、基因组等其它杂质。提取出的质粒DNA可直接用于细菌转化、酶切、PCR、体外转录、测序等其它下游实验。 保存条件:室温(15~30℃) 自备试剂:无水乙醇。 实验准备及重要注意事项: 本试剂盒可在干燥、室温(15~30℃)环境下保存1年,如需保存更长时间可将离心柱置于2~8℃。 第yi次使用,将RNase A溶液全部加入到Buffer N3中,混匀,置于2~8℃保存。 第yi次使用应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。 使用若Buffer L2有沉淀,请置于37℃水浴中不断混匀直至溶液变澄清方可使用。 操作步骤: 取600μL细菌培养液到1.5mL离心管(自备)中。 向上述离心管中加入100μL Buffer L2,温和地上下颠倒溶液8次,溶液应由浑浊变为澄清的紫色,表明裂解完全。裂解时间不应过2分钟。 向上述离心管中加入350μL Buffer N3(请先检查是否已加入RNaseA),立即上下颠倒约8~10次充分混匀,此时溶液应完全变为黄色并有黄色沉淀形成。13000rpm离心2~3分钟。 将步骤3中所得上清液缓慢倒入已备好的吸附柱吸附柱DM中,避免沉淀进入吸附柱。 13000rpm离心15,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。 向吸附柱中加入150μL Buffer PB,13000rpm离心15。 向吸附柱中加入400μL Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),13000rpm离心1分钟。 将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附膜的中间部位加入30~100μL Buffer EB,13000rpm离心1分钟,收集质粒DNA,-20℃长期保存。 |
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
核仁蛋白8(NOL8)酶联免疫试剂盒偶氮二羟酸二苄酯 94%油 technical grade, 80-85%O-叔丁基-L-丝氨酸甲酯盐酸盐
质粒快速小提试剂盒(0.6~3mL)Azilsartan
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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