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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

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无内毒素质粒DNA小提试剂盒(1.5~5mL)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/22 10:51:40

产品摘要:无内毒素质粒DNA小提试剂盒(1.5~5mL)公司正在热销的产品:结合转化活因子CITED1抗体Anti-SCG3/SgIII 分泌粒蛋白3抗体
Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体Anti-SCN1A SCN1A抗体
CSMD2蛋白抗体Anti-SCN2A SCN2A抗体
CSMD3蛋白抗体Anti-SCN9A/NAV1.7 电压开启的钠离子通道SCN9A抗体

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产品完善度: 访问次数:679

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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详细内容

下列是产品的订购信息!
中文名称
英文名称
产品规格
货号
无内毒素质粒DNA小提试剂盒(1.5~5mL)
Endotoxin-free Plasmid Mini Kit(1.5-5mL)
50次
GOY-F9704

产品说明书:
本试剂盒采用菌体内毒素清除剂,在质粒提取就把细胞壁上的内毒素清除掉,彻底避免了目通用的先提取DNA+内毒素混合物,再从中纯化质粒DNA的弊端。用本试剂盒提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。
试剂盒特点:
操作简单,只在经典的柱式质粒DNA提取,增加菌体内毒素清除一步。
去内毒素效果好,处理一次可以去除99%以上的内毒素。
质粒丢失少,产率只比柱式质粒低5~10%,效果好于先提质粒DNA,再用液相内毒素清除剂处理的方法。
DNA可以直接用于转染等实验。
储存条件:
常温运输及保存,有效期一年。RNase A(10mg/mL)需要低温运输和保存。
使用方法:
一、用菌体内毒素清除剂清除E.coli细胞壁上的内毒素。
收集1.5~5mL E.coli饱和菌液,12000rpm离心1分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
加入1mL菌体内毒素清除剂温和混匀后10000~12000rpm离心1分钟,弃上清(含内毒素)。
一次洗涤(1~2步)可以去掉90%以上的内毒素,如果需要,可以再重复上述洗涤操作步骤3次,得到的菌体可以直接进入后续的质粒DNA提取步骤。
二、从无内毒素的E.coli中提取质粒DNA
先将全部RNase A溶液全部加入到柱式质粒溶液A中,摇匀后再取用,未用完的柱式质粒溶液A好在4℃保存。
在第3步所得菌液中加入250μL柱式质粒溶液A,用枪头充分吹打使菌体重悬(此步在冰上操作效果更佳)。
注意:细胞未充分悬浮会影响后续操作,可以使用漩涡振荡器帮助混匀或使用Tip吸头吹打沉淀至完全混匀。
加入250μL柱式质粒溶液B(如果溶液B有沉淀,用须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀4~6次,看到溶液变粘即可,然后冰上放置不过4~5分钟。
注意:此步处理不能过5分钟,否则DNA的碱损伤比较严重。同时千万不要剧烈振荡,否则基因组DNA断裂产生的片段非常容易污染质粒DNA。溶液B用后需要将盖拧紧存放,否则空气中的二氧化碳会进入溶液,形成碳酸,中和溶液B中的NaOH,降低其效率)。
加入350μL冰上预冷的柱式质粒溶液C,反复颠倒混匀4~6次,可见白色沉淀物产生,然后冰上放置至少5分钟。
高转速(12000rpm以上)4℃离心5分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。如果此步的离心在室温进行,更容易出现沉淀物漂浮的现象。
静置2分钟以让质粒DNA与吸附柱充分结合,此步十分重要。
室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中的废液。
加入500μL的通用洗柱液,室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中废液。
注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。
重复上步1次。
室温12000rpm离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入30~100μL 65~80℃预热的DNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。常温的DNA洗脱液2.0也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。
室温12000rpm离心1分钟,离心管底溶液即质粒DNA。
注:由于的吸附柱结合DNA能力较,如果再加适量DNA洗脱液2.0到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多质粒DNA(相当于第yi次洗脱的20~30%),但注意不要使用上步得到的DNA洗脱液2.0来洗脱。
产品特点:
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
组氨酸丰富钙结合蛋白(HRC)酶联免疫试剂盒N,N-二甲基乙酰 or HPLC, ≥99.8% (GC) N,N-二甲基乙二 98%1-戊烷磺酸钠[离子对色谱]
阻抑素2(PHB2)酶联免疫试剂盒二水溶液 AR,40 wt. % in H2ON,N-二乙基乙二 98%1-己烷磺酸钠[离子对色谱]
阻抑素(PHB)酶联免疫试剂盒二 Standard for GCN,N'-二异基碳二酰亚 98%1-庚烷磺酸钠[离子对色谱]
足盂蛋白(PCX)酶联免疫试剂盒N,N-二甲酰 GR,99.9%叠氮磷酸二苯酯 97% 1-辛烷磺酸钠[离子对色谱]
棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)酶联免疫试剂盒N,N-二甲酰 for HPLC, ≥99.9%N,N-二异基乙二 97%1-壬烷磺酸钠[离子对色谱]
棕榈酰化膜蛋白5(MPP5)酶联免疫试剂盒溶液 AR,40%水溶液1-(2-二甲基氨基乙基)-1H-5-巯基-四氮唑 98%1-癸烷磺酸钠[离子对色谱]
棕榈酰化膜蛋白2(MPP2)酶联免疫试剂盒三溶液 AR,30 wt. % in H2O2,2-二氟-1,3-二甲基-咪唑烷 97%1-十一烷基磺酸钠[离子对色谱]
自噬相关16样蛋白1(ATG16L1)酶联免疫试剂盒三溶液 50%溶液1-乙基-(3-二甲基氨基基)碳二亚盐酸盐 98.5% 1-十二烷基磺酸钠[离子对色谱]
自噬/苄氯素1调节因子1(AMBRA1)酶联免疫试剂盒三 Standard for GC四甲基氟代脲六氟磷酸酯 98%1-十三烷磺酸钠[离子对色谱]
自身调节因子(AIRE)酶联免疫试剂盒4,4'-二氨基二苯砜 97%吡啶氢氟酸盐 65 - 70 % (HF)十二烷基硫酸钠[离子对色谱]
滋养层特异性糖蛋白(TPBG)酶联免疫试剂盒碳酸胍 99%2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 99%三(约0.5mol/L的水溶液[离子对色谱]
转运蛋白3(TNPO3)酶联免疫试剂盒硫酸胍 99%3-巯基-1,2,4-三唑 97%五氟酸(水溶液中约0.5mol/L)[离子对色谱]
转运蛋白2(TNPO2)酶联免疫试剂盒锌粒 99.99% metals basis三氧化硫-吡啶复合物 97%七氟丁酸(水溶液中约0.5mol/L)[离子对色谱]
转运蛋白1(TNPO1)酶联免疫试剂盒超纯锌粒 棒状,99.9999% metals basis四丁基氟化铵,三水 90%九氟戊酸(水溶液中约0.5mol/L)[离子对色谱]
转移抑制因子1(MTSS1)酶联免疫试剂盒锌 粉末,99.99% metals basisL-茶氨酸 98%十一氟己酸(约5mmol)[离子对色谱]
转位因子蛋白2(TSPO2)酶联免疫试剂盒锌 99.999% metals basisL-茶氨酸 99%十三氟庚酸(约5mmol)[离子对色谱]
无内毒素质粒DNA小提试剂盒(1.5~5mL)Acyclovir
59277-89-3
中文名: 阿昔洛韦
别 名:
分子式:C8H11N5O3
性状:Powder
纯度:99.0%
4-Aminobenzophe
1137-41-3
中文名: 4-氨基二苯甲酮
别 名:
分子式:C13H11NO
性状:Powder
纯度:99.0%
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。

热门标签:无内毒素质粒DNA小提试剂盒(1.5~5mL)

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