当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > DNA提取纯化 > 柱式质粒DNA小量抽提试剂盒(1.5~5mL)
柱式质粒DNA小量抽提试剂盒(1.5~5mL)
企业档案
会员类型:旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问
(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累,可持续信赖
阿仪网旗舰版会员:10年
最后认证时间:
注册号: 【已认证】
法人代表: 【已认证】
参观次数:6822274
详细内容
| 本试剂盒采用了一种新型的吸附材料,新吸附柱拥有良好的流速、的DNA结合能力和优秀的洗脱效率。改良的配方使试剂盒的菌液裂解能力、DNA与吸附柱的结合能力大大加,新型裂解染料Visualysis的加入让裂解过程变得可视、可控,实现质粒得率大化。对于高拷贝质粒,从6mL过夜菌液(OD600=2.0)中可以获得过35μg的质粒DNA。操作过程快速、方便,无需使用酚/抽提,无需乙醇沉淀,整个抽提过程可以在20分钟内完成。由本试剂盒抽提得到的质粒纯度高,OD260/OD280比值一般在1.8~1.9之间,OD260/OD230比值大于2.0,可直接用于转化、DNA测序、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切等后续实验。 试剂盒特点: 使用新型吸附柱材料,吸附容量大,洗脱效率高。 新型裂解染料Visualysis让裂解过程可视化,实现质粒得率大化。 操作过程快速、方便,无需使用酚/抽提,无需乙醇沉淀,全过程可在30分钟内完成。 保存:常温(18~25℃),RNase A收到后,请及时置于2~8℃保存,长期贮存请于-20℃放置。 注意: 加入RNase A后,Buffer P1请存放于2~8℃,有效期为半年。其他组分可于室温存放—年,长期存放请置于2~8℃。 Buffer P3和去蛋白液DW1中含有刺激性的化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。 快速操作流程: 准备工作。 □ 检查Buffer P1中是否已经加入RNase A。 □ 检查洗涤液WB中是否已经加入无水乙醇。 □ 检查Buffer P2和P3是否出现沉淀。 取1.5~5mL过夜培养的菌液,8000g离心2分钟收集菌体,弃尽培养基。 在沉淀中加入250μL Buffer P1,彻底悬浮菌体。 加入250μL Buffer P2,立即温和颠倒离心管5~10次混匀。室温静置2~4分钟。 加入350μL Buffer P3,立即温和颠倒离心管5~10次混匀。 12000g离心5~10分钟。将上清液移入吸附柱,8000g离心30,倒掉收集管中液体。 (选做)加入500μL去蛋白液DW1,9000g离心30,倒掉收集管中液体。 加入500μL洗涤液WB,9000g离心30,倒掉收集管中液体。 重复步骤8一次 空吸附柱9000g离心1分钟。 将吸附柱放入—个干净的1.5mL离心管中,在吸附膜中央加入50~100μL洗脱液EB,室温静置1分钟后,离心1分钟。保存管中DNA溶液。 |
| 中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
| 柱式质粒DNA小量抽提试剂盒(1.5~5mL) | SgPrep Column Plasmid Mini-Preps Kit(1.5-5mL) | 50次|100次 | GOY-F9839 |
使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
产品特点:
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
精氨酰tRNA合成酶(RARS)酶联免疫试剂盒固红紫LB盐 95%2-苯基乙基 硫代异酸酯 99%2-酚钠盐(>99.0%(HPLC)(T))
柱式质粒DNA小量抽提试剂盒(1.5~5mL)Tetracaine
热门标签:柱式质粒DNA小量抽提试剂盒(1.5~5mL)













