您好,欢迎来到阿仪网! 请登录 免费注册

  • 高级会员服务
  • |
  • 广告位服务
  • |
  • 设为首页
  • |
  • 收藏本站
  • |
  • 诚信档案

    • 会员类型:旗舰版会员
    • 阿仪网旗舰版会员:10年
    • 工商认证【已认证】
    • 最后认证时间:
    • 注册号: 【已认证】
    • 法人代表: 【已认证】
    • 企业类型:个体商户 【已认证】
    • 注册资金:人民币万 【已认证】
    • 产品数:

上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > DNA提取纯化 > 酵母质粒小量提取试剂盒(1.5~5mL)

酵母质粒小量提取试剂盒(1.5~5mL)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:24

产品摘要:酵母质粒小量提取试剂盒(1.5~5mL)正在出售的产品:磷酸化周期检测点酶2抗体Anti-CIDEB CIDEB抗体
磷酸化周期检测点酶2抗体Anti-Tsg101 tsg101抗体
磷酸化周期检测点酶2抗体Anti-TSHB 促甲状腺素抗体
遗传性脉络膜缺乏症相关蛋白抗体Anti-TSHB 促甲状腺素单克隆抗体

支付方式:

  • 支付宝 微信 银行转账

产品完善度: 访问次数:599

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

企业档案

会员类型:旗舰版

已获得阿仪网信誉   等级评定
90成长值

(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问

(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈

(91+  )优质信誉积累,可持续信赖

阿仪网旗舰版会员:10年

工商认证 【已认证】

最后认证时间:

注册号: 【已认证】

法人代表: 【已认证】

参观次数:6822274

手机网站:http://wap.app17.com/c130377/

旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性:
中文名称:酵母质粒小量提取试剂盒(1.5~5mL)
英文名称:Yeast Plasmid Mini Kit(1.5-5mL)
产品规格:50次
产品货号:GOY-F9791
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合lyticase特异消化酵母细胞壁,能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除细胞壁后,然后碱裂法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,后低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
快速、方便,不需要使用有毒的、等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
保存:室温储存12个月不影响使用效果。
注意事项:
所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C或者类似离心机。
溶液YP3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
通常酵母质粒拷贝数都很低,高拷贝质粒大得率一般为每5mL培养物提取1μg左右的质粒。用于下游试验时通常建议使用量为:
用于转化,选择高效率的感受态细胞
得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本螺旋可以过90%。
用户需要自备Sorbitol buffer(1M,0.1M Na2EDTA,14mMβ-巯基乙醇)。
配制方法:在600mL去离子水里面溶解182.2克,加入200mL 0.5M Na2EDTA (pH8.0),不需要调节PH值,定容到1L,4℃保存。临用加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。
菌体浓度检测一般OD600值为1的时候,酿酒酵母细胞是1~2×107 cells/ml,由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD值变化也很大,以上仅供参考。
洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
神经型一氧化氮合酶(NOS1)酶联免疫试剂盒氢氧化铝 99.8%,25μm氯汞 AR,99.5 %(剧品)二甲四氯(标准品)
神经酰激酶(CERK)酶联免疫试剂盒西咪替丁 99%氯 ACS(剧品)油酸甲酯(分析标准品,>99.0%(GC))
神经纤维网蛋白2(NRP2)酶联免疫试剂盒三硅酸镁 USP, Ph Eur化汞 AR,99.5%(剧品)烯酸甲酯(MA)(分析标准品,≥99.5%(GC))
神经纤维网蛋白1(NRP1)酶联免疫试剂盒2-丁酮 GC (剧品)化汞 CP,99.0%(剧品)丁酸甲酯(分析标准品,≥99.5%(GC),用于环境分析)
神经纤维素2(NF2)酶联免疫试剂盒无水乙 GR,99%硝 AR,98.5%(剧品)3-甲基胆蒽标准溶液(100 ng/μL ,基体:乙)
神经纤维素1(NF1)酶联免疫试剂盒盐酸 用于痕量分析, ≥37% (T)硝汞 CP,98.0%(剧品)异丁(分析标准品,≥99.8%(GC))
神经黏附分子(NCAM)酶联免疫试剂盒氧化锌 99.999% metals basisGR,99.0%(剧品)乙酸甲酯(分析标准品,99.9%(GC))
神经外营养蛋白4(NXPH4)酶联免疫试剂盒 AR,95%红色AR,99.5%(剧品)二乙二二甲(分析标准品,≥99.7%(GC))
神经外营养蛋白3(NXPH3)酶联免疫试剂盒2,2-偶氮二(2-甲基基咪) 97%黄色 AR,99.5%(剧品)甲基萘(标准品)
神经外营养蛋白2(NXPH2)酶联免疫试剂盒偶氮二异戊 98%乙 AR,98.0%(剧品)α-乙烯(标准品)
神经外营养蛋白1(NXPH1)酶联免疫试剂盒五硫化二锑 锑含量:66%溴 AR,99.5%(剧品)异丁基苯(分析标准品,>99.5%(GC))
神经突蛋白1(NRN1)酶联免疫试剂盒乙酰 AR,99%溴 CP,99.0%(剧品)异丁香酚(正+反)(分析标准品,用于环境分析)
神经调节肽U受体1(NMUR1)酶联免疫试剂盒乙酰 Standard for GC,≥99.5% (GC)硝酸亚 CP,98% 异(分析标准品,>99.7%(GC))
神经调节素4(NRG4)酶联免疫试剂盒乙酰 99.8%,升华纯化红 24~27%异(分析标准品,>99.9%(GC))
神经调节素3(NRG3)酶联免疫试剂盒硝酸铝 九水合物 AR,99.0%硫酸 CP,98.0%(剧品)乙酸异戊酯(分析标准品,用于萜烯分析,≥99.7%(GC))
神经调节素2(NRG2)酶联免疫试剂盒 AR,99%硫酸AR,99.0%(剧品)茚并(1,2,3-cd)芘标准溶液(3.80μg/mL,基体:甲)
酵母质粒小量提取试剂盒(1.5~5mL)N-(2,6-Diphenylmethyl)-1-piperazine acetylamine
5294-61-1
中文名:
别 名:
分子式:C14H21N3O
性状:Powder
纯度:98.0%
2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid
91702-98-6
中文名:
别 名:
分子式:C12H14O3S
性状:Powder
纯度:98.0%
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。

热门标签:酵母质粒小量提取试剂盒(1.5~5mL)

相关文章

快速导航

在线咨询5分钟应答

提交