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高纯酵母质粒大量提取试剂盒(100～180mL)
价格：￥电议
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:24
产品摘要：高纯酵母质粒大量提取试剂盒(100～180mL)正在出售的产品：CD53抗体Anti-TREML1/TLT1 髓系触发受体样转录因子1抗体
死亡同源蛋白6抗体Anti-TREML2/TLT2 髓系触发受体样转录因子2抗体
氯离子通道KB抗体Anti-Transferrin 转铁蛋白抗体
C型凝集素结构域家族12成员A抗体Anti-TRF2 端粒结合蛋白2抗体
死亡同源蛋白6抗体Anti-TREML2/TLT2 髓系触发受体样转录因子2抗体
氯离子通道KB抗体Anti-Transferrin 转铁蛋白抗体
C型凝集素结构域家族12成员A抗体Anti-TRF2 端粒结合蛋白2抗体
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详细内容
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性：
中文名称：高纯酵母质粒大量提取试剂盒(100～180mL)
英文名称：Yeast Plasmid Maxi Kit(100-180mL)
产品规格：10次
产品货号：GOY-F9785
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性：
中文名称：高纯酵母质粒大量提取试剂盒(100～180mL)
英文名称：Yeast Plasmid Maxi Kit(100-180mL)
产品规格：10次
产品货号：GOY-F9785
| 本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合破壁酶特异消化酵母细胞壁，能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后，加入破壁酶去除细胞壁后，然后碱裂法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，后低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。 试剂盒特点： 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 快速、方便，不需要使用有毒的、等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。 保存：室温储存12个月不影响使用效果。 保存事项： 第yi次使用时，将试剂盒所带的全部RNaseA加入溶液YP1（终浓度100μg/ml）置于4℃保存。如果溶液YP1中RNase A失活，提取的质粒可能会有微量RNA残留，在溶液YP1中补加RNase A即可。 环境温度低时溶液YP2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。 操作步骤：（实验请先阅读注意事项） 提示： ① 第yi次使用请先在漂洗液WB瓶中加入量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入! ② 将RNase A全部加入溶液P1中，混匀。每次使用后置于2～8℃保存。 ③ 将溶液P3放在冰上预冷。 ④ 吸取使用量的Sorbitol buffer加入0.1%β-巯基乙醇，回复到室温备用。 取约100～180毫升酵母培养物，6000×g，离心10分钟，尽可能的倒干上清，收集菌体。 收集过50毫升菌液，可以离心弃上清后，在同一个50mL管内加入更多的菌液，重复步骤1，直到收集到足够的菌体。 加入10mL Sorbitol buffer，轻柔吹打充分重悬细胞；加入0.1g破壁酶（破壁酶临用用2mL Sorbitol buffer溶解），充分颠倒混匀，37℃温育1～2小时消化细胞壁，中间可颠倒数次帮助消化。 如果破壁效果不好导致质粒产量过低，可以加大破壁酶用量来提高酶工作浓度，还可以延长消化时间或者提高温度到45℃来提高效果，不适合破壁消化的酵母可选用Lyticase或者Zymolase或者其它方法如加玻璃珠涡旋振荡，反复冻融等。 6000×g，离心10分钟，尽可能吸弃上清，加入7mL溶液YP1重悬菌体沉淀，涡旋振荡至彻底悬浮。 如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低。 加7mL的溶液YP2，温和地上下翻转4～7次使菌体充分裂解，室温放置4分钟。 温和地混合，不要剧烈震荡，以免基因组DNA剪切断裂！所用时间不应过5分钟！以免质粒受到破坏。此时菌液应变得清亮粘稠，如果菌体少，很快清亮粘稠后就可以做下一步，不是一定要准确的5分钟。如果未变得清亮，可能由于菌体过多，裂解不彻底，应减少菌体量。 加10mL溶液YP3，立即温和地上下翻转4～7次，充分混匀此时会出现白色絮状沉淀。冰上静置5～10分钟，4℃，至少2500×g离心20分钟(加大离心力可相应缩短离心时间，如15000×g离心10分钟)，小心取上清，避免吸取到漂浮的白色沉淀。 加入溶液YP3后应该立即混匀，以免产生SDS的局部沉淀，如果上清中还有飘浮白色沉淀，可再次离心后取上清。 可选，一般不需要：4℃，2500×g再次离心10分钟，小心取上清。 将上一步所得上清加入吸附柱DC中（吸附柱放入收集管中），静置2分钟，2500×g离心2分钟，倒掉收集管中的废液。 如果上清体积过20mL，可以分多次过柱。 加入10mL去蛋白液PD，2500×g离心2分钟，弃掉废液。 加入10mL漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），2500×g离心2分钟，弃掉废液。 重复操作步骤9一次。 将吸附柱DC放回空收集管中，高速（好大于9000×g，如果离心机转速低，需要相应延长离心时间）离心10分钟以干燥膜基质残留乙醇，用枪头吸除内圈压环和柱壁之间可能残留的乙醇，室温或者烘箱晾干几分钟。 该步骤目的为彻底去除吸附柱中残留乙醇，残留乙醇抑制下游反应并且严重降低洗脱效率，降低质粒产量。如果洗脱产量低，则必须加做步骤12。 可选步骤:选择以下两种方法之一干燥柱子： ① 取下柱子放置于真空容器中，密封真空容器，提供真空15分钟； ② 将柱子放置于60～65℃真空干燥箱或烘箱中，放置10～15分钟。 取出吸附柱DC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加1mL洗脱缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在65～70℃水浴中预热效果更好），室温放置2分钟，6000×g离心5分钟。如果需要较多量质粒，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，离心2分钟。 洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要质粒浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是小体积不应少于0.6mL，体积过小降低质粒洗脱效率，减少质粒产量。 |
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
视黄脱氢酶10(RDH10)酶联免疫试剂盒癸二酸二甲酯 97%2-溴已酸乙酯 99%2,3-二甲基丁烷(Standard for GC,>99.5%(GC))
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
视黄脱氢酶10(RDH10)酶联免疫试剂盒癸二酸二甲酯 97%2-溴已酸乙酯 99%2,3-二甲基丁烷(Standard for GC,>99.5%(GC))
视黄结合蛋白3(RBP3)酶联免疫试剂盒马来酸二乙酯 96%三氯化金水溶液 Au 23.5～23.8%甲(Standard for GC)
视黄结合蛋白1(RBP1)酶联免疫试剂盒马来酸二烯酯 97%2-溴丁酸甲酯 97%甲酸(Standard for GC,>99%)
视黄饱和酶(RETSAT)酶联免疫试剂盒邻苯二甲酸二乙酯 AR,99.5%2-溴已酸甲酯 98%呋喃(standard for GC,≥99.5%(GC))
视蛋白5(OPN5)酶联免疫试剂盒邻苯二甲酸二乙酯 CP,99.0%2-甲酯 97%正庚烷(Standard for GC,>99.5%(GC))
视蛋白4(OPN4)酶联免疫试剂盒己二酸二乙酯 CP,99.0%二氯四氨钯 Pd ≥43.0%正庚(Standard for GC,>99.5%(GC))
视蛋白3(OPN3)酶联免疫试剂盒二酸二叔丁酯 97%2-氨基-3-甲基吡啶 95%γ -丁内酯（GBL)(standard for GC,≥99.9%(GC))
矢车菊苷δ3(CENTδ3)酶联免疫试剂盒乙酸异辛酯 99%4-氨基-3-羟基苯甲酸 98%1-己烯(Standard for GC)
矢车菊苷δ2(CENTδ2)酶联免疫试剂盒对甲酸乙酯 99%4-氨基-3-氟吡啶 97%正己烷(Standard for GC,>99.5%(GC))
矢车菊苷δ1(CENTδ1)酶联免疫试剂盒溴乙酸乙酯 98%5-溴-2-氯嘧啶 97%六氯乙烷(Standard for GC, ≥99.5% (GC))
矢车菊苷γ3(CENTγ3)酶联免疫试剂盒2-庚 98%2-氯-6-氟苯 98%1-庚烯(standard for GC,≥99.5%(GC))
矢车菊苷γ2(CENTγ2)酶联免疫试剂盒乙酸正己酯 CP，98%5-(三氟甲基)-2-吡啶 97%位庚内酯(Standard for GC ,>98.5%(GC))
矢车菊苷γ1(CENTγ1)酶联免疫试剂盒乙酸异酯 99%2,3,4,5,6-五氟苯基酸 97%(+)-葑酮(standard for GC, ≥99.5% (GC))
矢车菊苷β6(CENTβ6)酶联免疫试剂盒异丁酸异丁酯 98%硫化铵溶液 AR,20% in H2O乙二丁(Standard for GC,≥99.5%(GC))
矢车菊苷β5(CENTβ5)酶联免疫试剂盒亚硝酸异戊酯 AR,90%氯铂酸 六水合物 AR,Pt ≥37.5%乙(GCS,>99.8%(GC))
矢车菊苷β2(CENTβ2)酶联免疫试剂盒乙酸异丁酯 99%氯金酸 48～50% Au basis乙酸乙酯(Standard for GC,≥99.7%(GC))
高纯酵母质粒大量提取试剂盒(100～180mL)11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione
高纯酵母质粒大量提取试剂盒(100～180mL)11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione
6870-94-6
中文名：
别 名： NSC 125051
分子式：C22H30O4
性状：Powder
纯度：98.0%
Methylprednisolone
83-43-2
中文名： 甲基泼尼松龙
别 名：
分子式：C22H30O5
性状：Powder
纯度：98.0%
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
热门标签：高纯酵母质粒大量提取试剂盒(100～180mL)
