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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生物制剂 > 其他 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > DNA提取纯化 > 柱式质粒DNA大提试剂盒(100~300mL)

柱式质粒DNA大提试剂盒(100~300mL)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/22 10:51:40

产品摘要:柱式质粒DNA大提试剂盒(100~300mL)公司正在热销的产品:含半胱和组丰富域蛋白1抗体Anti-CXCL14 CXC趋化因子14抗体
猪圆环病Ⅱ型衣壳蛋白Anti-Phospho-Aurora B (Thr232)/Aurora C (Thr198)

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产品完善度: 访问次数:717

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

产品特点:
低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、阴道拭子等。
可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
可以用柱式病毒DNA提取试剂盒或柱式病毒RNA提取试剂盒提取病毒核酸。
试剂本身安全环保无毒。
储存条件:常温,有效期一年。
下列是产品的订购信息!
中文名称
英文名称
产品规格
货号
柱式质粒DNA大提试剂盒(100~300mL)
Column Max Plasmid DNA Extraction Kit(100-300mL)
5次
GOY-F9706

产品说明书:
本试剂盒是用于质粒DNA大量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,一结合DNA,后洗去杂质,高效快速提取质粒DNA,全套操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒纯化得到的高纯度质粒DNA,可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
试剂盒特点:
快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。
纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8~2.0之间。
产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2~5μg/mL。
用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。
注意事项:
细菌培养时间一般为12~16小时,但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
溶液A:溶液B:溶液C的比例为3:3:4。若细菌量增大,需按此比例放大这些溶液的使用量。
随菌体增多应延长溶液B的作用时间,直至溶液成粘稠透明状。但时间过长会导致质粒DNA变性。
加溶液C后形成的白色沉淀中有变性的蛋白质、细菌基因组DNA和细胞碎片,离心后应避免带入到后续处理中。
通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次,否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。100mL高拷贝的菌液一般能得到700~1500μg质粒DNA,100mL低拷贝的菌液一般能得到150~350μg质粒DNA。
纯化的质粒在电泳中表现为2~3条带有时甚至为4~6条带均属正常,未分开的环套质粒,易被误判为基因组DNA。
使用方法:
用250mL离心管收集100~300mL菌液,5000rpm离心10分钟,去除上清。
往细菌沉淀中加入5mL溶液A,充分振荡悬浮(第yi次使用时需要将RNase A溶液全部加入到溶液A中并混合均匀,未用完的、含RNase A的溶液A需放4℃保存)。
注意:充分重悬细胞沉淀使之无细胞结块状物对于获得高的质粒产量十分重要。
加入5mL溶液B,温和翻转10余次至蓝色变得均匀。室温放置5~10分钟裂解细菌。
注意:避免剧烈振荡,否则细菌基因组DNA将断裂为小片段,与质粒难以分离,污染质粒DNA。溶液B用后需要将盖拧紧存放,否则空气中的二氧化碳会进入溶液,形成碳酸,中和溶液B中的碱,降低其效率。如果溶液B颜色不是蓝色,则表示变质,应该弃之不用并且速跟厂家联系。
加入冰浴的7mL溶液C,颠倒混匀,此时混合液应该从蓝色变成无色,如果不发生颜色变化,则表示溶液C变质,需要联系厂家。将混合液冰上放置10分钟,将有白色絮状物形成。注意不要过分振荡。
6000rpm离心10分钟。如果离心管承受能力,离心速度还可以适当提高以充分沉淀絮状物。
将上清液(约20mL)转移到离心吸附柱中,放入50mL套管中。由于此时的溶液比重较大,部分沉淀物悬浮在上清液中属正常,吸取上清时避开漂浮的沉淀物即可。
6000rpm离心5分钟,质粒DNA将与离心吸附柱中的膜结合。弃穿透液。
将10mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
重复上步一次,即将10mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
室温6000rpm空甩5分钟,弃穿透液。注意:此步对去除残留通用洗柱液很重要,否则通用洗柱液会影响DNA的使用。
将离心吸附柱放入一个自备的、干净的50mL塑料离心管中,加0.5mL DNA洗脱液2.0(洗脱液如加热到50~65℃效果更佳),室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,收集液即是质粒DNA溶液。
本试剂盒中的离心吸附柱吸附能力较,所以再用1mL DNA洗脱液2.0洗脱3~4次才能把绝大部分质粒DNA洗脱下来。得到的RNA可以收集在一起立即使用或存放于-80℃待用。
使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二容器内。二容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二容器摆放在用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由人(2人)运送,不得邮寄,好使用车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在⁻⁷0℃以下保存。无⁻⁷0℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存好在⁻⁷0℃温度以下进行。
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
转胶蛋白(TAGLN)酶联免疫试剂盒2,2,2-三氟乙 分子生物学,99.8%3-(4-)戊二酸 98%偶氮胂 I
转换蛋白2(TNP2)酶联免疫试剂盒2,2,2-三氟乙 NMR grade, ≥99.8%(4-溴苯基)乙炔 97%碱性品红(生物染色)
转换蛋白1(TNP1)酶联免疫试剂盒(3,3,3-三氟基)二氯甲基硅烷 98%4-溴-2-氟苯甲 98%碱性品红(分析标准品)
转化因子2β(TRA2β)酶联免疫试剂盒二苯烷 99%4-溴乙基苯 99%溴甲酚绿
转化因子2α(TRA2α)酶联免疫试剂盒碳化钨 粉末,99.9% metals basis, <10μm1-溴-3-苯 98%溴百里香酚蓝
转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)酶联免疫试剂盒三氟化甲络合物 50-52 wt% BF3 1-溴-4-苯 98%溴甲酚紫
转化受体电位阳离子通道亚家族M成员1(TRPM1)酶联免疫试剂盒特勒托利多 XS205DU 双量程0-81g,分辨率0.01mg4-溴-2-氟苯 99%溴甲酚紫(98%)
转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)酶联免疫试剂盒AL204电子天平 大称量值/可读性 210g/0.1mg1-溴-2-氟-4-苯 97%铋试剂Ⅱ(CP)
转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)酶联免疫试剂盒3-溴 98%4-溴-3-氟苯甲 97%铋试剂Ⅱ(98%)
转化生长因子β受体Ⅰ(TGFβR1)酶联免疫试剂盒六氯三聚磷 98%4-溴-3,5-二氟苯甲 98%铍试剂Ⅱ
转化生长因子β激蛋白22(TSC22)酶联免疫试剂盒原甲酸酯 98%1-溴-4-n-丁基苯 97%溴邻苯三酚红
转化生长因子β3(TGFβ3)酶联免疫试剂盒原甲酸酯 99.8%,无水1-溴-4-己苯 97%溴甲酚绿钠
转化生长因子β1(TGFβ1)酶联免疫试剂盒原甲酸三乙酯 99%4-正丁基联苯 97%盐酸副品红
转化生长因子α(TGFα)酶联免疫试剂盒原乙酸酯 98%4-溴-2-氟苯 98%二苯磺酸钡(CP)
转钴素蛋白Ⅰ(TCN1)酶联免疫试剂盒顺式六氢苯酐 99%邻溴苯 98%,含稳定剂铜屑二苯磺酸钡(98%)
转谷氨酰酶7(TGM7)酶联免疫试剂盒氢化双酚A 95%对氯苯 99%灿烂黄
柱式质粒DNA大提试剂盒(100~300mL)2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione
1971-49-9
中文名: 2-乙酰基-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮
别 名:
分子式:C10H7NO3
性状:Powder
纯度:93.0%
DL-Alanyl-DL-Methionine
1999-43-5
中文名: DL-丙氨酰-DL-蛋氨酸
别 名:
分子式:C8H16N2O3S
性状:Powder
纯度:99.0%

热门标签:柱式质粒DNA大提试剂盒(100~300mL)

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