一、实验目的

水质五日生化需氧量（BOD5）、菌落总数、总大肠菌群是水环境监测核心指标，两类检测所需培养温度不同，常规单腔生化培养箱只可分批开展，实验周期长、占用设备多，容易造成样品时效性失效。多箱一体式生化培养箱 ZSH-150T-II为上下双层独立腔体一体式生化培养箱，两腔可分别设置不同温度，能够同步开展 BOD5 恒温培育与微生物菌落培养，在有限实验室空间内实现两组不同温区实验并行，减少设备投入，规避样品搁置带来的数据偏差，为环境监测实验室提供稳定可靠的同步培养方案。

二、实验步骤

（一）仪器与试剂耗材

仪器：多箱一体式生化培养箱 ZSH-150T-II（双层两腔独立控温，控温范围 0~70℃，恒温波动度 ±0.5℃，温度均匀性 ±1℃，温度分辨率 0.1℃，彩色触摸屏独立设置参数） 配套设备：溶解氧仪、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台 耗材：BOD 培养瓶、培养皿、移液枪头 试剂：磷酸盐缓冲液、硫酸镁溶液、氯化钙溶液、氯化铁溶液、接种液、营养琼脂培养基、乳糖蛋白胨培养基

（二）样品前处理

1. BOD5 水样：按照标准要求对水样进行稀释、接种，装入 BOD 培养瓶，密封，检查瓶内无气泡；

2. 微生物样品：水样梯度稀释，分别涂布营养琼脂平板、接种乳糖蛋白胨管，做好样品编号标记。

（三）设备参数设置

上层腔体：设置 20℃，用于 BOD5 样品 5 天恒温避光培养； 下层腔体：设置 36℃，用于细菌菌落总数、总大肠菌群培养； 开机预温，待两个腔体温度均稳定达到设定值、温场均匀后放入样品。

（四）恒温培养与检测

将 BOD 培养瓶平稳放入上层腔体，平板、发酵管放入下层腔体，关闭箱门，开始计时培养；BOD5 连续培养 5d，菌落总数培养 48h，总大肠菌群培养 24h。培养结束后，取出 BOD 瓶测定溶解氧，计算 BOD5 数值；取出平板计数菌落、观察发酵管产气情况，完成微生物结果判定，同步记录两组实验数据。

三、注意事项

• 两个腔体相互独立，设置参数时确认对应腔温，避免温区设置混淆；

• BOD 培养全程避光，样品摆放不要遮挡箱内循环风道，保证温度均匀；

• 每次实验结束后，内胆、搁板及时擦拭消毒，防止交叉污染；

• 定期校准双腔温度，保证两个腔体控温精度满足国标要求；

• 设备具备超温报警功能，实验前确认报警功能正常，防止样品失效。

四、实验结论

多箱一体式生化培养箱 ZSH-150T-II 双层独立控温结构，可同时满足 20℃的 BOD5 培养与 36℃微生物培养，无需两台独立培养箱，节省实验室占地。双腔温场均匀稳定，平行样品重复性良好，检测结果符合国标质控要求，适合第三方环境实验室、环监站批量水样同步检测，提升样品检测效率。