产品介绍

AF532-NPL是将从水仙鳞茎中天然提取的Narcissus Pseudonarcissus凝集素（NPL），与Alexa Fluor532橙绿色荧光染料通过稳定的酰胺共价偶联技术制备而成的糖链特异性高亮度荧光标记科研试剂。它完整保留了水仙凝集素对高甘露糖型寡糖链、末端α-D-甘露糖残基的高亲和力识别特性，同时引入AF532染料与532nm固态激光器的完美适配性能，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离AF532染料，解决了传统Cy3类染料光稳定性不足、532nm通道激发效率偏低的痛点。试剂以稳定的橙红色至紫红色冻干粉末形式提供，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是糖生物学研究中532nm激光通道下高甘露糖糖链示踪的高可靠性特色工具。

基础参数

中文名称：Alexa Fluor532标记水仙凝集素，AF532-水仙凝集素

英文名称：AF 532 NPL，AF532-NPL，Alexa Fluor532-NPL，Alexa Fluor532-Narcissus Pseudonarcissus Lectin

外观状态：橙红色至紫红色冻干粉末

荧光光谱参数：激发波长约532 nm，发射波长约554 nm

储存条件：-20℃以下避光密封干燥保存，避免反复冻融，复溶后4℃环境下可短期放置2周，操作过程中全程严格避光，防止AF532荧光染料发生光漂白降解

用途：高甘露糖糖链橙绿色荧光标记，532nm激光共聚焦成像，多色荧光实验独立通道糖示踪

作用机理

AF532-NPL中的水仙凝集素蛋白以天然活性二聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中含末端α-1,3或α-1,6连接甘露糖残基的高甘露糖型寡糖链，对高甘露糖结构的亲和力远高于普通单甘露糖分子。共价偶联在蛋白表面赖氨酸残基上的AF532荧光基团，可被生物实验室广泛标配的532nm固态激光器直接高效激发，发射出明亮的554nm橙绿色荧光，该波段与常规AF488绿色荧光、AF594红色荧光的光谱间隔充足，几乎无通道串扰，直接将凝集素的糖链识别信号转化为独立的橙绿色荧光信号，无需二次孵育等复杂操作，一步孵育即可完成靶标高甘露糖糖链的原位标记，整个过程不会破坏凝集素的天然糖结合活性，也不会对样本的基础细胞结构造成明显影响。

应用领域

AF532-NPL可用于高甘露糖糖链橙绿色荧光标记，对固定细胞或组织切片进行一步孵育标记，清晰呈现样本中高甘露糖型糖蛋白的精细分布模式，荧光信号锐利明亮，细节表现。该试剂可应用于532nm激光共聚焦成像，依托染料与532nm激光的完美光谱匹配，在低激光功率下即可获得高信噪比的成像结果，大幅降低高功率激光对活细胞或样本结构的光损伤。同时它也适用于多色荧光实验独立通道糖示踪，与AF405、AF488、AF594等不同波段的荧光探针搭配使用，在多色成像面板中占据独立的532nm通道，实现不同靶标蛋白与高甘露糖糖链的同步无串扰共定位分析，为多维度联合糖生物学研究提供稳定可靠的特色工具。

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