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Y15

MCE 国际站：Y15

CAS：4506-66-5

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：4°C, sealed storage, away from moisture

生物活性：Y15 是一种有效的特异性粘着斑激酶 (FAK) 抑制剂，可抑制其自身磷酸化活性，降低癌细胞的活力，并阻止肿瘤生长。 IC50 和目标：FAK^[1]体外 Y15 直接阻断 FAK 的自磷酸化活性。 Y15 在 Panc-1 细胞中从 0.1 μM 开始抑制 FAK 的 Y397 磷酸化。在 100 μM 的剂量下，Y15 具有与 TAE226 相同或更好的抑制作用。值得注意的是，总 FAK 在较高剂量的 Y15 下调。 Y15 还阻断 FAK 下游底物桩蛋白的磷酸化。在类似于 FAK 的较高剂量下总桩蛋白减少。因此，Y15 以剂量依赖的方式抑制 FAK 磷酸化^[1]。 MTS 测定是在所有细胞系（分别为 TT、K1、BCPAP 和 TPC1）上使用一系列 Y15 剂量完成的。Y15 在所有评估的甲状腺细胞系中以剂量依赖性方式抑制细胞活力。对于 TT、TPC1、BCPAP 和 K1，IC₅₀ 分别为 2.05、5.74、9.99 和 17.54 μM^[2]。 In Vivo： 携带 Panc si-ctrl 异种移植物的裸鼠用 FAK 和 IGF-1R 酪氨酸激酶双重抑制剂 TAE226 处理，为抗肿瘤作用提供参考FAK 和 IGF-1R 的双重抑制。在没有药物治疗的情况下，Panc si5-IGF-1R 异种移植物比 Panc si-ctrl 异种移植物生长慢（Panc si5-IGF-1R/PBS vs. Panc si-ctrl/PBS），表明仅通过抑制 IGF-1R 通路实现中度肿瘤抑制. Y15 处理对 FAK 活性的进一步抑制更显着地抑制了 Panc si5-IGF-1R 异种移植物的生长（Panc si5-IGF-1R/PBS 对比 Panc si5-IGF-1R/Y15）。在用 TAE226 处理的 Panc si-ctrl 异种移植物中观察到类似的抗肿瘤作用（Panc si5-IGF-1R/Y15 对比 Panc si-ctrl/TAE226）。小鼠在整个实验过程中表现出正常的梳理和进食习惯^[3]。

体外：Y15 直接阻断 FAK 的自磷酸化活性。 Y15 在 Panc-1 细胞中从 0.1 μM 开始抑制 FAK 的 Y397 磷酸化。在 100 μM 的剂量下，Y15 具有与 TAE226 相同或更好的抑制作用。值得注意的是，总 FAK 在较高剂量的 Y15 下调。 Y15 还阻断 FAK 下游底物桩蛋白的磷酸化。在类似于 FAK 的较高剂量下总桩蛋白减少。因此，Y15 以剂量依赖的方式抑制 FAK 磷酸化^[1]。 MTS 测定是在所有细胞系（分别为 TT、K1、BCPAP 和 TPC1）上使用一系列 Y15 剂量完成的。Y15 在所有评估的甲状腺细胞系中以剂量依赖性方式抑制细胞活力。对于 TT、TPC1、BCPAP 和 K1，IC₅₀ 分别为 2.05、5.74、9.99 和 17.54 μM^[2]。

体内：用FAK和IGF-1R酪氨酸激酶双重抑制剂TAE226处理携带Panc si-ctrl异种移植物的裸鼠，为FAK和IGF-1R双重抑制的抗肿瘤作用提供参考。在没有药物治疗的情况下，Panc si5-IGF-1R 异种移植物比 Panc si-ctrl 异种移植物生长慢（Panc si5-IGF-1R/PBS vs. Panc si-ctrl/PBS），表明仅通过抑制 IGF-1R 通路实现中度肿瘤抑制. Y15 处理对 FAK 活性的进一步抑制更显着地抑制了 Panc si5-IGF-1R 异种移植物的生长（Panc si5-IGF-1R/PBS 对比 Panc si5-IGF-1R/Y15）。在用 TAE226 处理的 Panc si-ctrl 异种移植物中观察到类似的抗肿瘤作用（Panc si5-IGF-1R/Y15 对比 Panc si-ctrl/TAE226）。小鼠在整个实验过程中表现出正常的梳理和进食习惯^[3]。

激酶试验：激酶缓冲液中的 10 μCi [γ-32P]-ATP 将 20 mM HEPES、pH 7.4、5 mM MgCl2、5 mM MnCl2、0.1 mM Na3VO4 与 0.1 μg 纯化的 FAK 蛋白在激酶缓冲液中与 10 μCi [ γ-32P]-ATP。激酶反应在室温下进行 5 分钟，并通过添加 2× Laemmli 缓冲液终止。在 Ready SDS-10% PAGE 凝胶上分离蛋白质，并通过放射自显影观察磷酸化烯醇酶 [1]

细胞试验：用不同浓度的 Y15 或 TAE226 处理细胞 24 小时。添加来自 Promega Viability 试剂盒的 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺基苯基)-2H-四唑化合物，并将细胞在 37° 下孵育C 1-2小时。使用酶标仪在 490 nm 处分析 96 板上的光密度以确定细胞活力。此外，用 Y15 处理 24 小时后，用台盼蓝对细胞进行染色，并用血细胞计数器测定染色呈阳性的细胞百分比[1]

动物体内实验:小鼠[3] 使用六周龄的雌性裸鼠。将5×106 Panc si5-IGF-1R细胞与基质胶混合并皮下注射到无胸腺裸鼠的胁腹中（第0天）。第7天将动物随机分为两组。一组(n=5)接受Y15(30mg/kg)，另一组接受PBS作为对照治疗(n=5)。对于Panc si-ctrl异种移植物，将5×106 Panc si-ctrl细胞与基质胶混合并皮下注射到裸鼠的胁腹中。这些动物在第7天也被随机分为两组，一组（n=5）接受TAE226（30mg/kg），另一组接受PBS（n=5）作为对照治疗。药物和PBS通过腹腔注射施用，总体积为0.1mL。从第10天开始，每3或4天测量一次肿瘤大小，长度(mm)×宽度(mm)。肿瘤体积计算为体积(cm3)=1/2×长度(cm)×宽度(cm)2。

研究领域：Protein Tyrosine Kinase/RTK

作用靶点：FAK

参考文献：

[1]. Hochwald SN, et al. A novel small molecule inhibitor of FAK decreases growth of human pancreatic cancer. Cell Cycle. 2009 Aug;8(15):2435-43.[2]. O＇Brien S, et al. FAK inhibition with small molecule inhibitor Y15 decreases viability, clonogenicity, ａnd cell attachment in thyroid cancer cell lines ａnd synergizes with targeted therapeutics. Oncotarget. 2014 Sep 15;5(17):7945-59.[3]. Zheng D, et al. A novel strategy to inhibit FAK ａnd IGF-1R decreases growth of pancreatic cancer xenografts. Mol Carcinog. 2010 Feb;49(2):200-9.[4]. Xuchen Hu, et al. Release of cholesterol-rich particles from the macrophage plasma membrane during movement of filopodia ａnd lamellipodia. Elife. 2019 Sep 5;8:e50231.