一、待测样品准备

1、准备好25cm2细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞（1至5 X 106细胞）

2、小心加入xx毫升清理液（Reagent A），覆盖生长表面

3、小心抽去清理液

4、使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞（注意：避免使用胰酶消化）

5、加入xx毫升清理液（Reagent A），混匀细胞

6、移入到预冷的15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）

7、放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g

8、小心抽去上清液

9、加入xx微升裂解液（Reagent B），充分混匀

10、转移到预冷的1.5毫升离心管

11、强力涡旋震荡15秒

12、置于冰槽里孵育30分钟

13、放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

14、小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管

15、移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－我司有售）

16、即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

尊敬的客户：

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