关键词:薄层扫描法 穿心莲 脱水穿心莲内酯 含量测定

穿心莲Andrcgraphis paniculata(Burn．f．)Nees 收载于1995版中国药典，具有清热解毒、凉血，消肿 的功效。已有报道从穿心莲中分离出穿心莲内酯 ( 口出：印pb de)、新穿心莲内醋(Neomu：h．~ra— pholide)、脱氧穿心莲内醋(14 一Deoxyan— drographolide)、脱水穿心莲内醋(14一deox3,一11，12 一Deh~ holide)等12种内醋类戚份“ 。 现有的测定方法有碱水解法 、比色法[3]、薄层扫描 法“l5]，主要测定前3种内醋或总内醋的舍量。本实 验通过薄层检查，发现脱水穿心莲内酯和脱氧穿心 莲内酯具有相同的 值，两斑点重舍，难以分开．但 利用其紫外最丈吸收波长的差别．采用双波长薄层 扫描法仍可测定脱水穿心莲内酯的舍量。

1 实验部分

1．1 仪器与试剂

日本岛律CS一930双渡长薄层扫描仪；薄层点 样仪(CAMAGNANOMAT Ⅲ)；双槽展开缸10cra× 20cm(CAMAG))。

硅腔G ．青岛海洋化工厂生产(薄层色谱 用)。

所用试剂均为分折纯。

1 2 薄层扫描法测定穿心莲中脱水穿心莲内酯的含量实验条件

1．2．1 薄层色谱条件

硅腔GF’m板，10cra×20cn’,_，以0 3％ 羧甲基纤 维索钠为牯合剂，厚度500．tan，110℃ 活化l小时备 用。展开荆为一丙酮(15：7．5)。

薄层展开后，脱氧穿心莲内酯点样量在20旭以 下时．置紫外光灯(254nm)下柱规，无紫红色暗斑。 喷2％ 3．5一二硝基苯甲酸己醇溶液与2m0j，L氢氧 化钾溶液的等量{昆合液．日光下观察脱氧穿心莲内 葺旨呈暗紫红色斑点．井持续十几分钟后缓慢担色；脱 水穿心莲内硝呈紫红色斑点，立即槎色。

1 2 2 扫描条件

以上对照品在紫外光区(200~370nm)的吸收光 谱圜见图1。

采用双波长反射法线性扫描， =．263ran，^R= 371)nm 。

L3 标准曲线绘制

取经真空干燥24小时后脱水穿心莲内醋对照 品5mg．精密称定，置5ml量瓶中，用己醇溶解井定 容。精密吸取上述对照液0．5 1．2、3、4、5|^1分别点 样、展开、扫描测定。以对照品溶液浓度为横坐标。 斑点面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线．得回归方 程：Y=0．054+2．337X．r=0 988。线性范围为0． 45-4．50．ttg。

1．4 穗定性试验

精密吸取对照品溶液适量、点样、展开．每隔一 定时问扫描测定，结果样品斑点积分值在2．5小时 内基本稳定。

1．5 点样精密度试验

精密吸取对腻品溶液适量点样．共6个点．展 开，扫描测定其积分值．RSD=2．79％ 。

1．6 回收率试验

精密称取穿心莲药材粗粉0．25g，加^已知浓度 的对照品溶液．同样品测定项下测定，回收串平均值 为99．9％(n=5，RSD=2．70％)。

1．7 样品测定

取穿心莲药韦|粗粉0．5g，精密称定，加乙醇 50ml拎浸30分钟，再超声波振荡提取30分钟，滤过．残渣用乙醇适量洗涤三孜，合并滤渡，蒸干，残渣 用乙醇适量溶解并定客至lOmi，作为供试品溶液。 精密吸取供试品溶液2}^1、对照品溶液l}^1与3 ，分 别点于同一薄层板上，依法展开，扫描测定。共测定 了l4个不同来源的样品．并且分叶和地上部分分别 测定。测得结果见表1。

2 小结

2．1 样品提取曾试用乙醇热回藏提取、冷浸过夜以及超声浴振荡提取三种方法．结果以本文所用的方 法最为简便、快速、提取效果好。薄层展开时．室温 应控制在26℃ 左右。

2．2 通过测定，发现穿心莲叶中脱水穿心莲内酯的 含量差异较大，而且叶的含量普遍高于茎枝，因此中 国药典(95版)在“穿心莲”检查项中规定叶不得少于 35％，为药材质量提供了保证。