1 仪器与试药

Agilent 1200型高效液相色谱仪，绿原酸对照品 (含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号： 110753—200413)；乙腈、甲醇均为色谱纯，磷酸为分析 纯，水为纯化水；抗感颗粒(烟台渤海制药有限公司生 产，批号：091034，091136，l91220，每袋10 g，相当于含 金银花、赤芍各7 g，绵马贯众2．33 g)。

2 方法与结果

2．1 色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 色谱柱为VP—ODS C】R柱(4．6 mm×250 mil，5 m)； 流动相为乙腈_0．4％ 磷酸溶液(16 ：84)；流速为 1．0 mL·min ；检测波长为327 lln]；检测温度为室温； 理论塔板数以绿原酸计算不低于1 000。 2．2 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适 量，加50％ 甲醇溶解制成每毫升含绿原酸对照品 6O g的溶液，即得，l0℃以下保存。

2．3 供试品溶液的制备 取本品5袋，研细，称取 1．5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50％ 甲醇 50 mL，称定质量，超声处理(功率250 W，频率 35 kHz)30 min，放冷，再称定质量，用50％ 甲醇补足减 失质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，置25 mL 棕色量瓶中，加50％ 甲醇至刻度，摇匀，即得。

2．4 阴性对照溶液的制备 按处方取缺金银花的其 他各药物，按处方工艺制备，制得阴性对照品溶液。照 供试品的测定方法进行测定，结果表明，其他组分对绿 原酸的测定无干扰。

2．5 线性关系考察 分别精密吸取绿原酸对照品溶 液(0．12 mg·mL。。)1，2，4，6，8 mL，分别置于10 mL棕 色量瓶中，加50％ 甲醇至刻度，摇匀。分别精密吸取 稀释液10 ，按供试品项下实验方法，分别注入液相 色谱仪。以对照品的进样量( ， g)对峰面积(Y)进 行线性【旦J归，L口j归方程为：Y=2．90×10 X～5．77，r= 0．999 8。结果表明绿原酸进样量在0．12～0．96 g 范围内与峰面积具有良好的线性关系。

2．6 精密度实验取对照品溶液连续进样5次，峰面 积积分值的RSD为0．91％ 。

2．7 重复性实验取样品1批，平行制备5份供试品 溶液，分别按“2．3”项下方法测定含量，测定结果的 RSD为0．86％ 。

2．8 稳定性实验取供试品1份，在0．5，1．0，4．0， 8．0 h分别按供试品项下方法实验，结果RSD 为 0．92％ ，实验表明在8 h内供试品溶液稳定。

2．9 回收率实验精密称取已知含量的供试品6份 (各约0．7 g)，精密称定，各精密加入适量绿原酸对照 品溶液(0．55 mg·mL。)，依供试品溶液制备法进行 提取及含量测定，计算回收率，结果平均回收率为 99．65％ ，RSD=1．36％ 。见表1。

2．10 样品的含量测定取本品3个批号，按“2．2” 和“2．3”项下方法制备溶液，精密吸取供试品溶液与 对照品溶液各10 L，注入高效液相色谱仪，结果批号 为091034，091136，091220的绿原酸含量分别为每袋 101．22，100．07，102．12 mg。

3 讨论

本实验的提取及含量测定应于当天完成，实验证 明若提取后超过24 h测定含量，绿原酸的含量会偏 低。

笔者在本实验曾采用Agilent Extend C。 色谱柱， 大连依利特C 色谱柱，Dikma Diamonsil C。 色谱柱，均 为(4．6 lIllIl X 250 IIlIll，5 m)，结果不同厂家色谱柱 对测定结果影响不大。

本方法的阴性对照品在与绿原酸对照品的吸收峰 处无干扰峰，方法简单，重复性好，可以作为抗感颗粒的质量标准，建议在以后的标准修订中，增加绿原酸的 含量测定，以提高该药品的质量检测水平。