1 仪器与试剂

Agilent 1 100型高效液相色谱仪，Mettler Toledo AG135 型电子分析天平(瑞士Mettler公司)，SCQ一250型超声波 提取仪(上海申波超声公司)。 芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号： 110736．200732)；乙腈为色谱纯，水为纯净水，其它试剂 均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 色谱条件：色谱柱：Hypersil ODS一2(4．6 mm×150 mm，5．01xm，依利特公司)；流动相：乙；1~-o．4％ 的磷酸水 溶液(10：90)；检测波长：230 nm；流速1．0 ml／min；柱 温：25℃ ；进样量：lOlxl。

2．2 溶液制备

2．2．1 对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品3．04 mg，置10 ml量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀， 即得对照品溶液(1 ml含芍药苷0．304 mg)。

2．2．2 供试品溶液的制备：称取供试品颗粒约0．50 g，置 具塞50 ml容量瓶中，加入甲醇30 ml，放置浸泡4 h后， 超声处理20 min，放冷至室温 。用甲醇定容至刻度，摇 匀，滤过，即得。

2．2．3 阴性对照品溶液的制备：按狼疮灵颗粒制备工艺制 得缺少赤芍的阴性样品制剂，再按2．2．2项的方法制备， 制得阴性对照品溶液。

2．3 线性关系考察：取上述对照品溶液，分别自动进样2 l、4 txl、6 txl、8 l、10 l。以芍药苷峰面积积分值为纵坐标 (Y)，以芍药苷对照品的进样量( g)为横坐标(X)，绘制标 准曲线。得回归方程为：Y=1427．68X+5．96，r=0．9999。 结果表明，进样量在0．608～3．041xg范围内线性关系良好。

2．4 专属性试验：精密吸取对照品溶液，供试品溶液，阴 性对照品溶液各lOla,1，并按上述色谱条件测定。结果表明 在芍药苷出峰位置无干扰峰(见图1、2、3)。

2．5 精密度试验：精密吸取对照品溶液101xl，重复进样5 次，测得峰面积积分值，计算得芍药苷的RSD为1．19％ (n=5)，结果表明精密度良好。

2．6 稳定性试验：精密吸取同一批号的供试品溶液(批 号：20100318)，按色谱条件分别于制备后0、4、8、12、 16、24 h进行测定。记录峰面积，计算得芍药苷的RSD为 1．30％ (n=5)，表明芍药苷含量在24 h内稳定性好。

2．7 重复性试验：精密称取同一批号(批号：20100318)的样品5份，按供试品溶液制备方法制备，并按以上色谱 条件测试，测得芍药苷平均含量9．73 mg／g，RSD为 1．24％ (n=5)。

2．8 加样回收试验：精密称取已知含量的狼疮灵颗粒为 0．10 g，精密添加一定量的芍药苷对照品，按供试品溶液 制备法制备，并按以上色谱条件测定。结果见表1，平均 回收率为97．77％ ，RSD为0．62％。

2．9 样品测定：分别精密称取不同批号的狼疮灵颗粒约 0．5g，按供试品溶液制备法制备，分别精密吸取对照品溶 液和供试品溶液各10／．zl，注入高效液相色谱仪中，按以上 色谱条件测试。结果见表2。

根据实验结果、药材的来源以及制剂生产、储藏等因 素，暂拟订每批样品以芍药苷含量为标准，每1g颗粒不得 低于9．7 mg。

3 讨论

本实验曾采用2005版《中国药典》赤芍中芍药苷测定 所用流动相：甲醇-0．05mol／L磷酸二氢钾溶液(40：65)， 结果主峰分离度不好，存在于扰，经过分析比较，最终确定乙腈一0．4％ 的磷酸水溶液(10：90)为流动相，杂峰集 中，可使芍药苷得到较好的分离。 本实验采用HPLC法测定狼疮灵颗粒中芍药苷的含量， 提取方法简单，分析快速，精密度高，重现性好，阴性无 干扰，能较好控制本品的质量。