提供者:上海沪宇生物科技有限公司 发布时间:2012/10/16 10:37:20 阅读次数:596次 进入该公司店铺
大鼠酶联免疫试剂盒原理:此法采用定量夹心酶联免疫技术。抗体具体为NSMCE2已经被预先涂到微孔板。标准和样品吸入井和任何NSMCE2目前被绑定的固定化抗体。生物素共轭的抗体特异性NSMCE2除去任何未结合的物质后,加入到孔中。抗生物素蛋白共轭的辣根过氧化物酶(HRP)的洗涤后,加入到孔中。经过洗涤,以除去任何未结合的抗生物素蛋白的酶试剂,底物溶液加入到孔中,显色成比例的量的初始步骤中的约束的NSMCE2。彩色显影被停止并测量的颜色的强度。
检测步骤: 在使用前,将所有试剂和样品室温。再次离心样品解冻后测定前。据建议,所有样品和标准来测定一式两份。
1。准备好所有试剂,工作标准和样品在前面的章节中。
2。请确定井数的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥剂,密封保鲜袋,将未使用的井在4°C的含量布局表
。每孔加入100μl的标准和样品。封面用胶粘带提供。孵育2小时,在37℃下 一盘布局记录标准和样品检测。
4。每孔中取出的液体,不洗。
5。向每孔中加入100μl生物素抗体(1倍)。盖上一个新的胶粘带。孵育1小时,在37℃下 (生物素抗体(1X)可能会出现混浊。预热至室温,轻轻混匀,直到出现均匀解决方案。)
6。吸液的各孔和洗涤,共洗涤三次重复该过程两次。洗净,每孔填充洗涤缓冲液(200μL)使用喷瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,静置2分钟,彻底清除液体的每一步是必不可少的良好的性能。最后一次洗涤后,清除任何剩余洗涤缓冲液的吸ordecanting。倒置板和涂抹对干净的纸巾。
7。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一个新的粘接剂条。温育1小时,在37℃下
8。重复的愿望/洗涤过 程中,在步骤6的5倍。
9。将90μlTMB底物添加到每个孔中。孵育15-30分钟,在37℃下 避光
10。一站式解决方案,每孔加入底物,轻轻晃动酶标板,以确保充分混合。
11。在5分钟内,设置至450nm,使用酶标仪测定各孔的光密度。如果波长校正,设置为540 nm或570 nm处。在540 nm或570 nm波长在450 nm处的读数减去读数。该减法校正板的光学缺陷。在450 nm处未经修正读数直接,可能会比较高,不太准确。
① 凡本网注明"来源:阿仪网"的所有作品,版权均属于阿仪网,未经本网授权不得转载、摘编或利 用其它方式使用。已获本网授 权的作品,应在授权范围内使用,并注明"来源:阿仪网"。违者本网将追究相关法律责任。
② 本信息由注册会员:上海沪宇生物科技有限公司发布并且负责版权等法律责任。
版权声明