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Hydroxyphenyl Fluorescein (solution)

MCE 国际站：Hydroxyphenyl Fluorescein (solution)

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-DY1035

CAS：359010-69-8

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运输条件：美国大陆地区的室温；其他地区可能有所不同。

产品活性：Hydroxyphenyl Fluorescein (HPF) (solution) 是一种稳定的 ROS 荧光探针染料，比 H2DCFDA (HY-D0940) 的特异性与稳定性强。Hydroxyphenyl Fluorescein 通过羟基自由基，与细胞内过氧亚硝基反应，可产生强烈的绿色荧光。Hydroxyphenyl Fluorescein 可应用于荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标仪或流式细胞仪。其荧光波长：Ex/Em=490/515 nm。溶剂及浓度：DMSO：10 mM

生物活性：羟苯基荧光素 (HPF)（溶液）是一种稳定的活性氧 (ROS) 荧光探针染料。羟苯基荧光素比 H2DCFDA (HY-D0940) 具有更强的特异性和稳定性。羟苯基荧光素可通过羟基自由基与细胞内过氧亚硝基反应产生强烈的绿色荧光。羟苯基荧光素可应用于荧光显微镜、高通量成像仪、荧光素酶微孔板读数仪或流式细胞术。激发/发射波长为 490/515 nm[1]。溶剂及浓度：DMSO：10 mM

体外：HPF 工作液的配制1.1 保存储存液HPF 储存液建议分装后于 -20 °C 或 -80 °C 避光保存。1.2 工作液的配制用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，可根据实际情况稀释相应的储备液。注意，如果溶剂为 DMSO，则必须考虑 DMSO 的细胞毒性，并应制备溶剂对照；如果溶剂为纯水，则工作液在加入细胞前需要过滤并除菌。注：请根据实际情况调整 HPF 工作液浓度，且现用现配。细胞染色2.1 准备工作悬浮细胞：离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。贴壁细胞：弃去培养基，加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。2.2 加入 1 mL HPF 工作液，室温孵育 15 分钟。2.3 400 g，4°C 离心 3-4 分钟，弃去上清。2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。

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参考文献：

[1]. Ming-De Li, et al. Dynamics of Oxygen-Independent Photocleavage of Blebbistatin as a One-Photon Blue or Two-Photon Near-Infrared Light-Gated Hydroxyl Radical Photocage. J Am Chem Soc. 2018 Nov 21;140(46):15957-15968.