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Annexin V-mCherry 细胞凋亡检测试剂盒

MCE 国际站：Annexin V-mCherry Apoptosis Detection Kit

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K1076

中文名称：Annexin V-mCherry 细胞凋亡检测试剂盒

存储条件：-20°C，1年避光保存，避免反复冻融

产品活性：Annexin V-mCherry 细胞凋亡检测试剂盒可方便、快捷的检测细胞凋亡。经 Annexin V-mCherry 染色后，正常细胞基本无荧光，凋亡细胞及坏死细胞呈红色荧光。

生物活性：MCE Annexin V-mCherry 细胞凋亡检测试剂盒采用红色荧光蛋白 mCherry 标记的重组人 Annexin V 来检测细胞凋亡。在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine, PS）位于细胞膜内侧；细胞凋亡早期，PS 会外翻到细胞膜外侧。Annexin V（膜联蛋白 V）是一种 Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，可与 PS 特异性结合，因此 Annexin V 常作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。Annexin V 经 mCherry 标记后可发红色荧光，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。与藻红蛋白（Phycoerythrin, PE）相比，mCherry 标记的Annexin V 的激发光谱更窄，更适合与其他绿色荧光一起检测。经 Annexin V-mCherry 染色后，正常细胞基本无荧光，凋亡细胞及坏死细胞呈红色荧光。

操作流程：1. 收集 1-5 × 105 个细胞。 悬浮细胞：1000 g 离心 5 min，弃去上清。加入 1 mL 预冷的 PBS 轻轻重悬细胞沉淀，1000 g 离心 5 min，弃去上清，保留细胞沉淀。 贴壁细胞：小心吸取细胞培养液保存备用。加入 PBS 洗涤后，加入适量胰酶消化液（尽量不含 EDTA，以免影响 Annexin V 和 PS 的结合）消化细胞。加入前面收集的培养液，轻轻吹打细胞，制成单细胞悬液，1000 g 离心 5 min，弃去上清。加入 1 mL 预冷的 PBS 轻轻重悬细胞沉淀，1000 g 离心 5 min，弃去上清，保留细胞沉淀。 注：建议胰酶消化液不含 EDTA。 2. 加入 195 μL Binding Buffer。 3. 加入 5 μL Annexin V-mCherry。可根据实际情况调整 Annexin V-mCherry 的使用量。 4. 室温下避光孵育 10-20 min。孵育过程中可轻轻颠倒数次以加强染色效果。 5. 适用流式细胞仪或荧光显微镜观察 (Ex = 587 nm; Em = 610 nm)。

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