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淋巴细胞分离液1.084
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:40:57
人非神经元性烯化酶(NNE)ELISA试剂盒
人多巴-β羟化酶(DBH)ELISA试剂盒
人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA试剂盒
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详细内容
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：淋巴细胞分离液1.084
英文名称：Lymphocyte separation medium1.084
产品规格：100ml
发货周期：1～3天
淋巴细胞分离液（Lymphocyte Separation Medium 1.084，简称LSM-1.084）是一种无菌的即用型分离液，基于B?yum的Ficoll-甲泛影钠溶液做过一些改良，使得操作简单快速且分离效率更高。本品是无菌的聚蔗糖Ficoll/泛影酸钠混合溶液，密度为1.084 g/ml，内毒素含量很低（＜0.12 EU/ml），是在严格控制的环境下加工生产的，生产条件符合ISO13485:2003标准和GMP认证。相对于密度为1.077 g/ml的人淋巴细胞分离液，本品适用于分离更高密度的人单个核细胞，包括外周血，脐带血以及骨髓瘤来源的组织样本。还适用于分离大小鼠血细胞，正因为啮齿动物的淋巴细胞密度稍高于人淋巴细胞。
工作原理
去纤维蛋白或抗凝人血以1：1的比例用无菌生理盐水或平衡盐溶液稀释，小心的添加在分离液上层（不要混杂在一起），之后离心30-40min。离心过程中，差速迁移使其终形成几个不同的细胞分层：
①聚集在管底的颗粒主要是Ficoll 聚集的红细胞以及沉淀物；
②紧挨着上面一层的颗粒主要是粒细胞，其处于LSM-1.084溶液的渗透压临界，具有足够高的密度迁移穿过LSM-1.084溶液层。
③单个核细胞分布在血浆和LSM-1.084分离液的中间层，还包括一些沉降系数低（密度低）的颗粒，如血小板。
淋巴细胞，单核细胞和血小板不具有足够高的密度穿透LSM-1.084分离液层，因此这些细胞在血浆和LSM-1.084分离液层聚集形成一个中间分层。吸取中间层，用平衡盐溶液短暂洗涤，以除去血小板，细胞分离介质和血浆，就可以单个核细胞。通常情况下，分离所得的细胞中95±5%为单个核细胞，细胞存活率＞90%，回收率为60±20%。
储存条件：4～8℃，避光
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
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嘧菌酯人甘露聚糖结合凝集素丝氨肽1(C4/C2 RA反应因子的激活因子)(MASP1)免疫试剂盒Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体phospho-C-Myc(Thr373) 化致癌因C-Myc抗体
烯唑 分析标准品，99.5%人甘胆(CG)免疫试剂盒Ⅲ型胶原蛋白/胶原蛋白3/3型胶原蛋白抗体phospho-C-Myc(Thr358) 化致癌因C-Myc抗体
烯唑人甘氨免疫试剂盒IV型胶原蛋白/4型胶原蛋白/胶原蛋白4抗体phospho-Claudin 6(Tyr219) 化紧密连接蛋白6抗体
环戊酮-2-羧乙酯 97%人干因子受体(SCFR)免疫试剂盒列腺素氧化环化酶1抗体phospho-c-kit(Tyr936) 化原癌因c-kit抗体
4(5)-羟咪唑盐盐 98%人干因子/肥大生长因子(SCF/MGF)免疫试剂盒Ⅰ型胶原抗体Phospho-c-Kit(Tyr721) 化原癌因c-kit抗体
2－－4-氧乙 >98.0%(T)人干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)免疫试剂盒Ⅴ型胶原抗体Phospho-c-Kit(Tyr703) 化原癌因c-kit抗体
多效唑 分析标准品,>99%(HPLC)人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫试剂盒Ⅹ型胶原抗体Phospho-c-Kit(Ser741) 化原癌因c-kit抗体
多效唑人干扰素诱导T趋化因子(ITAC/CXCL11)免疫试剂盒周期素F抗体Phospho-c-Kit(Ser721) 化原癌因c-kit抗体
戊炔草 分析标准品人干扰素活化因205(Ifi205)免疫试剂盒泛素连接酶CUL7蛋白抗体phospho-CK8 (Ser23) 化角蛋白8抗体
炔酰草人干扰素调节因子8(IRF8)免疫试剂盒状腺受体相互作用蛋白15抗体phospho-CK18(Ser74) 化角蛋白18抗体
硫氢化钠，水合 68⁻⁷2 %人干扰素调节因子3(IRF3)免疫试剂盒信号转导蛋白亚6抗体phospho-CK18(Ser33) 化角蛋白18抗体
二 97%人干扰素a-抗体(Anti-IFN-ab)免疫试剂盒信号转导蛋白亚4抗体Phospho-CK17 (Ser44) 化角蛋白17抗体
4-()吡啶盐盐 97%人钙转运ATP酶2C型成员1(ATP2C1)免疫试剂盒心肌肌钙蛋白抗体phospho-CK II beta(Ser209) 化丝氨/苏氨蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗体
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热门标签：淋巴细胞,分离液1.084
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