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人淋巴细胞分离液
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详细内容
中文名称:人淋巴细胞分离液
英文名称:
产品规格:200ml
发货周期:1~3天
人淋巴细胞分离液采用优质原料科学配方配制而成。适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞。本品为无菌溶液。
储存条件:室温(18-25℃)避光保存。
开封后 2-8℃保存。
有效期:两年。
使用方法:
由于各离心机的性能差异以及实验室的温度不同,佳分离条件(离心转速、离心时间等)请根据实际摸索。
1.取新鲜抗凝血 1ml,与1ml Hank’s液混匀。
2.将以上液体小心加于 1ml的细胞分离液的液面上。
3.以 1500RPM离心15分钟。
4.此时离心管中由上至下细胞分四层。一层:血浆或组织匀浆液层。第二层:环状乳白色淋巴细胞层。第三层:透明分离液层。第四层:红细胞层
● 此红细胞层,表面有悬起的部分白细胞层。收集界面上的细胞,放入含 4-5毫升Hank’s 液的试管中,充分混匀后,以1500-2000RPM离心10分钟。收集第二层细胞(淋巴细胞)沉淀经2次洗涤收集细胞。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
二亚砜-d6 D.99.9% +0.05%TMS人高密度脂蛋白3(HDL3)免疫试剂盒环子孢子蛋白(约氏疟原虫)抗体Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518) 化二氢嘧啶酶样2抗体
二亚砜-d6 D.99.9% +1%TMS人高密度脂蛋白2(HDL2)免疫试剂盒3号染色体开放阅读框30抗体Phospho-CRMP2 (Thr514) 化二氢嘧啶酶样2抗体
二亚砜-d6 D.99.9% septum人高密度脂蛋白1(HDL1)免疫试剂盒CX3CL1抗体phospho-Crkl(Tyr244) 化接头蛋白CrkL抗体
氧化氘 (D, 99.96%)人高密度脂蛋白(HDL)免疫试剂盒脱羧酶蛋白体36抗体phospho-Crkl (Tyr207) 化接头蛋白CrkL抗体
氧化氘 (D, 99.9%) 人高灵敏度促状腺激素(U-TSH)免疫试剂盒3号染色体开放阅读框78抗体phospho-Crk p38 (Tyr221) 化Crk p38抗体
氧化氘 (D, 99.8%) STERILITY TESTED人高分子量脂联素(HMW Adiponectin)免疫试剂盒过敏素C5a/补体C5a抗体phospho-CRK (Ser41) 化CRK抗体
氧化氘 (D, 99.9%) LOW PARAMAGNETIC人高分子量角蛋白(CK-HMW)免疫试剂盒卵巢癌抗原抗体phospho-CREM (Ser271 +Ser 274) 化环腺苷反应元件调节蛋白抗体
氚代二氧六环 D,99%人高尔体抗体(AGAA)免疫试剂盒粘附分子相关蛋白a1抗体phospho-CREB-1(Ser142) 化CREB-1抗体
氘代乙-d6 99.5 atom % D人高尔蛋白73(GP⁻⁷3)免疫试剂盒21号染色体开放阅读框69抗体phospho-CREB-1(Ser133) 化CREB-1抗体
氘代乙 D,99% anhydrous人高半胱氨(Hcy)免疫试剂盒周期相关激酶抗体phospho-CREB-1(Ser129) 化CREB-1抗体
氘代-d4 D,99.8% septum人刚地弓形虫(T.gondii)免疫试剂盒癌相关抗原抗体phospho-CREB-1(Ser121) 化CREB-1抗体
氘代-d4 D,99.8% (0.03% v/v TMS)人肝脂酶(HL)免疫试剂盒半胱蛋白酶蛋白-6抗体(N端)phospho-c-Raf(Tyr341) 化原癌因c-Raf抗体
氘代-d5 D,99%人肝脏型脂肪结合蛋白(L-FABP)免疫试剂盒周期素依赖性激酶3抗体phospho-c-Raf(Thr269) 化原癌因c-Raf抗体
氘代邻二-d10 D,98%人肝脏甘油三脂脂肪酶(HTGL)免疫试剂盒钙调酶抗体phospho-c-Raf(Ser494) 化原癌因c-Raf抗体
氚代吡啶-d5 (D, 99.5%) +0.05% V/V TMS人肝生长因子受体(c-MET/HGFR)免疫试剂盒钙蛋白酶1抗体phospho-c-Raf(Ser471) 化原癌因c-Raf抗体
人淋巴细胞分离液19号染色体开放阅读框42抗体Human ATG4B ELISA Kit白头翁皂苷A3 Anemoside A3 Pulchinenoside A3
19号染色体开放阅读框44抗体Human ATG7(Auhagy-related protein 7) ELISA KitFMOC-L-亮氨酸
19号染色体开放阅读框48抗体Human BBS8 ELISA Kit偶氮氯膦Ⅳ
19号染色体开放阅读框50抗体Human ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA KitDEAE琼脂糖凝胶CL-6B
19号染色体开放阅读框51抗体Human ATIC ELISA Kit1,5-萘二磺酸四水物
19号染色体开放阅读框52抗体Human ARP2 ELISA Kit4-溴氯苯
19号染色体开放阅读框55抗体Human ATR ELISA Kit人抗α干扰素抗体(IFNα-Ab)ELISA试剂盒,IFNα-Ab ELISA
19号染色体开放阅读框56抗体Human ATG4B ELISA Kit人乙型肝炎病S2抗体(HBV preS2Ab)ELISA试剂盒,HBV preS2Ab ELI
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