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一氧化氮合成酶(分型NOS)检测试剂盒
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详细内容
一氧化氮合成酶(分型NOS)检测试剂盒
产品货号:XY9-47022
产品规格及价格:50T/950元
产品简介:
NOS 催化 L-Arg 和分子氧反应生成 NO,NO 与亲核性物质生成有色化合物,在 530nm 波长下测定吸光度,根据吸光度的大小可计算出 NOS 活力。
NOS主要有两种类型,结构型(cNOS),依赖钙,诱导性(iNOS)。结构型(cNOS)主要存在于神经元和内皮细胞内,依赖钙;诱导性(iNOS)主要存在于巨噬细胞内,不依赖钙。
可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
可以为您提供各种颜色的TM M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

使用方法:
1.样本及试剂从冰箱取出,平衡至室温后使用;试剂 D 和试剂 E 必须 37℃水浴至澄清透明,再进行操作,否则会影响结果。
2.试剂 A 与配制好的试剂 B 工作液应尽量避免反复冻融。
3.试剂 B 工作液现用现配,配好后尽量一日内用完,如有剩余则-20℃以下保存不超过一周;未配制之前的试剂 B1 和 B2 溶解液均应-20℃以下保存,如淡黄色或白色粉末变成咖啡色或黄褐色颗粒则失效不可用。
4.试剂 F 为过饱和溶液,一次用不完再次使用时可能会有结晶,使用前可以再次边沸水浴边用玻璃棒搅拌使其溶解;
5.NOS 活性低,稳定性差,样品或匀浆上清如不马上检测,应置-20℃以下冷冻保存。
6.室温低时,NOS 试剂 E 会出现浑浊,如果已经在测试管中加入了 NOS 试剂 E,可将测试管对着灯光,观察有无结晶或浑浊。如果有结晶或浑浊,请将每只测试管放到 37℃水浴锅中晃动 5 分钟,再比色。
7.所有实验用水均需使用纯水或双蒸水。
8.需使用一次性塑料试管,若没有,使用较新的玻璃管并洗刷干净。
试剂配制
1. 试剂 A:临用前化冻摇匀。没有用完的试剂,可以-20℃以下避光冷冻保存以备下次再用。
2. 试剂 B 工作液配制:使用前取试剂 B2 溶解液一瓶 600ul 加入一支试剂 B1 粉剂中充分混匀(即将 1.5ml 小离心管反复颠倒,并将小离心管尖部的液体离心下来),测试后剩余的试剂可放入-20℃以下冷冻保存,时间不超过一周。
若发现粉剂变成黄褐色或咖啡色,则不可再用。
3. 试剂 D:天冷后会凝固,待 37℃水浴变澄清时再使用。
4. 试剂 E:室温低时会出现浑浊,待 37℃水浴加热至透明后再用。
5. 试剂 F:使用前请仔细查看,如有结晶附着在瓶壁或瓶底,可将试剂连同瓶子一起在 90-100℃热水中摇至完全溶解,方可使用。
操作步骤:
(一)、操作表
按下表加入试剂:
(二)、NOS 酶活力计算公式:
A、血清中 NOS 酶活力计算::
(1)单位定义:每毫升血清每分钟生成 1nmol NO 为一个酶活力单位。
(2)计算公式:
TNOS 活力(U/mL)= TNOS 测定管 OD 值—TNOS 空白管 OD 值 x 反应液总体积 x 1 ÷1000 呈色物纳摩尔消光系数 取样量 比色光径 x 反应时间
= TNOS 测定管 OD 值—TNOS 空白管 OD 值 x 2.51+X x 1 ÷1000 38.3x10-6 X 1x15
iNOS 活力(U/mL)= iNOS 测定管 OD 值—iNOS 空白管 OD 值 x 反应液总体积 x 1 ÷1000 呈色物纳摩尔消光系数 取样量 比色光径 x 反应时间
= iNOS 测定管 OD 值—iNOS 空白管 OD 值 x 2.51+X x 1 ÷1000 38.3x10-6 X 1x15
iNOS 活力(U/mL)= iNOS 测定管 OD 值—iNOS 空白管 OD 值 x 反应液总体积 x 1 ÷1000 呈色物纳摩尔消光系数 取样量 比色光径 x 反应时间 = 0.149—0.010 x 2.51+0.03 x 1 ÷1000 =20.485U/mL 38.3x10-6 0.03 1x15
B、组织 NOS 酶活力计算:
(1)单位定义:每毫克组织蛋白每分钟生成 1nmol NO 为一个酶活力单位。
(2)计算公式
TNOS 活力(U/mgprot)= TNOS 测定管 OD 值—TNOS 空白管 OD 值 x 反应液总体积 x 1 ÷ 呈色物纳摩尔消光系数 取样量 比色光径 x 反应时间待测样本蛋白浓度(mgprot/L)
= TNOS 测定管 OD 值—TNOS 空白管 OD 值 x 2.51+ X x 1 ÷待测样本蛋白浓度(mgprot/L) 38.3x10-6 X 1x15
iNOS 活力(U/mgprot)= iNOS 测定管 OD 值—iNOS 空白管 OD 值 x 反应液总体积 x 1 ÷ 呈色物纳摩尔消光系数 取样量 比色光径 x 反应时间待测样本蛋白浓度(mgprot/L)
= iNOS 测定管 OD 值—iNOS 空白管 OD 值 x 2.51+ X x 1 ÷待测样本蛋白浓度(mgprot/L) 38.3x10-6 X 1x15
【注】:mgprot 为毫克蛋白
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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