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过氧化氢(H2O2)检测试剂盒(定量,分光光度计)
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详细内容
过氧化氢(H2O2)检测试剂盒(定量,分光光度计)
产品货号:XY9-47031
产品规格及价格:50T/1100元
产品简介:
过氧化氢H2O2检测试剂盒检测原理是H2O2与显色剂反应生成黄色的过氧化物-显色剂复合物,该黄色复合物在412nm处有光吸收,其黄色深浅与过氧化氢浓度在一定范围内呈线性关系,通过分光光度计检测412nm处吸光度,即可换算样品中过氧化氢浓度。
该试剂盒可以用于检测血清、血浆、细胞、组织等样品中过氧化氢(H2O2)含量。
过氧化氢(H2O2)是生物体内最常见的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化产生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。生命体内积累的H2O2是由一些氧化物催化超氧阴离子发生氧化还原反应而形成,H2O2相对超氧阴离子性质稳定,但其存在可以直接或间接导致细胞膜脂质过氧化损害,加速细胞的衰老和解体,H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。
可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

使用方法:
1.H2O2 标准和反应液应严格密闭保存,避免挥发,否则效率会下降。
2.过氧化物-显色剂复合物黄色沉淀溶解于溶解液时需要一段时间,需完全溶解,否则有可能影响比色结果。
3.本试剂盒亦可用酶标仪进行检测,但检测的样本数相应增加。
4.加入碱性基液、硫酸钛溶液时,应直接加入至溶液中,不要粘到管壁。
5.H2O2 标准品 A 和溶解液 D 有一定腐蚀性,请小心操作。
6.显色剂 C 溶解于水后应尽早使用,如暂时不用,可短期放置 4℃冰箱保存。亦可用分析天平称取一定量的粉剂,配置 5%的浓度即可。
样品处理:
A. 血清(浆)中 H2O2 含量测定
直接取原液检测
B. 组织中 H2O2 含量测定
准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的生理盐水,1g 组织加入 9ml 生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,1000 转/分,离心 10 分钟,取上清匀浆待测。
H2O2 标准品工作液的配制 :
由于过氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。
本试剂盒提供的 H2O2 基液的 H2O2 浓度约为 1M,用纯水稀释 100 倍,使 H2O2 浓度约为 10mM。纯水调零,分光光度计测定 A240,根据公式 H2O2 浓度(mM)=22.94×A240 计算出 H2O2 基液中 H2O2 的实际浓度,再用丙酮稀释 H2O2 基液配制 10mM H2O2-丙酮标准溶液。
(一般情况下,新配制的 10mM H2O2 基液 A240 为 0.4~0.45,3 个月以后 A240 为 0.35~0.42) 按下表依次稀释(常用浓度 0.3~3Mm,即 1~5 号):
配制显色溶液:
将 0.3g 显色剂试剂 C 小心缓慢的加入至 6ml 纯水中,即为 5%显色剂溶液,4℃避光保存。
测定:
1. 按下表 H2O2 加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的 H2O2 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测能设置平行管。
【注】:
加入试剂 B、显色剂溶液时,应直接加至溶液中,不要粘到管壁。
2. 充分混匀,室温放置 5min。
3. 在 4 12000g ℃ 离心 15min,弃上清液,留沉淀。(如有必要可加入预冷丙酮反复洗涤沉淀物)
【注】:
空白管无需该步骤。
4. 向标准管、测定管的沉淀中加入 2ml 溶解液 D,摇动,使沉淀完全溶解。
【注】:
空白管无需该步骤。
5. 比色杯光径 1cm,以空白调零,以分光光度计测定 412nm 处系列标准管、测定管的吸光度。
【注】:
如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计测定。
计算:
以系列丙酮- H2O2 溶液(0.3、0.5、0.8、1、3、5、8mM)为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得待测样品中 H2O2 含量。
血清(浆)中 H2O2 含量:H2O2 (mmol/L)=C0×N组织中 H2O2 含量:H2O2 (mmol/g)=C0×VT×N)/m式中:
C0=根据待测样品的吸光度在标准曲线求得 H2O2 浓度(mM)
VT=待测样品的总体积(L)
m=样品质量(g)
N=样本稀释倍数
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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