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羟自由基检测试剂盒-深红色荧光
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详细内容
羟自由基检测试剂盒-深红色荧光
产品货号:XY9-4705622
产品规格及价格:100T/1600元;200T/2700元
产品简介:
活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、一氧化氮(NO,Nitric oxide)、超氧阴离子(•O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)、ClO-和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果,在呼吸链中,在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应,在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧:“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2•-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B),同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C),生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D),在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH•(图1E),超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
羟基自由基(•OH)检测试剂盒是一种利用羟基自由基(•OH)特异性深红色荧光探针 O28进行羟基自由基检测的试剂盒 O28可自由透过活细胞膜进入细胞内,并被细胞内的羟基自由基(•OH)氧化,产生红色荧光产物。根据活细胞中红色荧光的产生,可以判断细胞羟基自由基(•OH)含量的多少和变化。用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察,是一种快速简便的组织或培养活细胞中羟基自由基(•OH)检测方法。
在激发波长560nm,发射波长575 nm附近,使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测荧光,从而测定细胞内羟基自由基(•OH)水平。
除了本红色荧光检测试剂盒外,还可以提供绿色荧光的羟基自由基(•OH)检测试剂)。
可以提供各种颜色的总活性氧检测产品,以及不同颜色的各种类型活性氧、活性氮的特异性检测产品。
产品特点:
1.使用方便:可用激光共聚焦显微镜直接观察、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便

使用方法:
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.荧光探针标记后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
3.探针标记完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的标记情况是否正常。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
5O28 探针在光照和空气中易被氧化,注意避光密封保存。
6.对不同的细胞,应选择合适的孵育时间,以观察羟自由基的变化。
O28 探针标记:
1. O28 溶液可在新鲜无血清培养基、HBSS 缓冲液、PBS 缓冲盐溶液稀释到所需浓度,200 倍稀释,以此染色工作液更换细胞培养基;也可直接向细胞孵育液体中加入 O28 探针溶液至所需浓度。
2. 依据细胞羟自由基含量的不同,孵育时间可选择 15-90 分钟,在 37℃或室温进行避光孵育3. 孵育结束后,用新鲜溶液清洗细胞。
4. 用相关仪器进行荧光检测。
荧光显微镜检测:
1. 对贴壁生长细胞或活组织,可直接在荧光显微镜下染色观察;
2. 对悬浮生长细胞,染色后取 25-50µl 细胞悬液滴到一张显微载玻片上,再盖上一张盖玻片。
3. 荧光显微镜检测。
流式细胞仪分析:
1. 对贴壁生长细胞,用胰酶消化制备成单细胞悬液;对悬浮生长细胞,直接收集细胞。用 0.5~1 ml 冰冷 PBS重悬细胞(5~10 万)。
2. 采用 560nm 波长激发,测定 575 nm 的发射,羟自由基强度高的细胞有较强的红色荧光
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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