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H9C2-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:30
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详细内容
H9C2-RFP-Puro稳转株
英文名称 | H9C2-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-R1100 |
中文名称 | RFP 标记的 H9C2 稳转株 |
Lot number | H9C2-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成肌细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS+ 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、基本概念
1. 细胞株背景
H9C2 细胞：
来源于大鼠胚胎心脏组织的永生化心肌细胞株，具有心肌细胞的部分特性（如可诱导分化、表达心肌相关蛋白），常用于心血管疾病、药物毒性、细胞分化等研究。
RFP 标记：
RFP（Red Fluorescent Protein，红色荧光蛋白）是一种报告基因，通过基因转染技术整合到细胞基因组中，使细胞表达红色荧光，便于通过荧光显微镜或流式细胞术等手段进行可视化追踪、分选或示踪。
Puro 抗性：
Puro（嘌呤霉素，Puromycin）是一种抗生素，可通过基因转染引入细胞，使稳转株获得对嘌呤霉素的抗性，用于筛选成功整合目标基因的细胞（未整合的细胞会被嘌呤霉素杀死）。
2. 稳转株定义
“稳转株” 指通过基因工程技术将外源基因（如 RFP）稳定整合到细胞基因组中，并能在传代过程中持续表达目标蛋白（RFP）的细胞株。H9C2-RFP-Puro 即通过嘌呤霉素筛选获得的稳定表达 RFP 的 H9C2 心肌细胞株。
二、构建流程
载体构建：
构建包含 RFP 基因和 Puro 抗性基因的重组质粒（如慢病毒载体、质粒载体等），通常带有启动子（如 CMV）以驱动基因表达。
细胞转染：
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）等方法将重组质粒导入 H9C2 细胞。
抗性筛选：
转染后的细胞在含有嘌呤霉素的培养基中培养，未成功整合质粒的细胞死亡，存活细胞为稳定整合外源基因的单克隆或混合克隆。
单克隆筛选与鉴定：
通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆细胞，利用荧光显微镜检测 RFP 表达水平，确保荧光信号稳定且均一。
三、应用场景
细胞示踪与迁移研究：
利用 RFP 荧光标记，在活体或体外观察 H9C2 细胞的迁移、定植或分化过程（如在心肌损伤模型中追踪移植细胞的分布）。
药物筛选与毒性评估：
通过荧光信号强度变化或细胞存活率，快速评估药物对 H9C2 细胞的影响（如心肌毒性药物筛选）。
基因功能研究：
作为基础细胞株，进一步转染其他目的基因（如心肌相关基因、信号通路分子），结合 RFP 标记进行共表达研究。
细胞共培养体系：
与其他细胞（如成纤维细胞、免疫细胞）共培养时，通过 RFP 区分 H9C2 细胞，分析细胞间相互作用。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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