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PC-12(高分化)-RFP-Puro稳转株
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详细内容
PC-12(高分化)-RFP-Puro稳转株
英文名称 | PC-12(高分化)-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-R1104 |
中文名称 | RFP 标记的 PC-12(高分化) 稳转株 |
Lot number | PC-12(高分化)-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 多角形细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

PC-12 细胞背景:PC-12 细胞是源自大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤的细胞系,具有神经内分泌特性,常被用于神经科学研究。PC-12 细胞在神经生长因子(NGF)等因素作用下可向神经元样细胞分化,根据其分化状态可分为未分化状态、低分化状态和高分化状态。高分化状态下的 PC-12 细胞具有多个突起,突起数量不等且较长,类似神经元的轴突,表达神经生长因子(NGF)受体,并且不合成肾上腺素。
RFP 和 Puro 的含义:
RFP:即红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein),是一种常用的报告基因。在细胞生物学研究中,将 RFP 基因导入细胞后,细胞能够表达出红色荧光蛋白,在荧光显微镜下可发出红色荧光,便于对细胞进行标记、追踪以及观察细胞内的各种生理过程,例如观察细胞的迁移、分化,或者研究基因的表达定位等。
Puro:指嘌呤霉素(Puromycin),是一种抗生素。在稳转株构建过程中,它被用作筛选标记。含有 Puro 抗性基因的载体转入细胞后,只有成功整合了外源基因并表达出 Puro 抗性蛋白的细胞,才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,而未成功转染的细胞则会被嘌呤霉素杀死,从而实现对稳定转染细胞的筛选。
稳转株的构建:通常是利用慢病毒感染等方法,将携带 RFP 基因和 Puro 抗性基因的载体导入 PC-12(高分化)细胞中。病毒载体将外源基因整合到细胞的染色体上,使细胞能够稳定地表达 RFP 和对嘌呤霉素产生抗性。经过嘌呤霉素的筛选,得到能够稳定传代并持续表达红色荧光蛋白的 PC-12 细胞,即 PC-12(高分化)-RFP -Puro 稳转株。
应用:这种稳转株在神经科学研究中具有多种用途。一方面,通过红色荧光可以方便地观察高分化 PC-12 细胞在体外培养条件下的生长、分化、迁移等行为,以及在动物模型中的分布和归巢情况;另一方面,可用于研究特定基因在 PC-12 细胞高分化状态下的表达调控机制,或者筛选对 PC-12 细胞高分化过程有影响的药物及其他生物活性物质等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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