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UMR-106-GFP-Puro稳转株
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详细内容
UMR-106-GFP-Puro稳转株
英文名称 | UMR-106-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-R1101 |
中文名称 | GFP 标记的 UMR-106 稳转株 |
Lot number | UMR-106-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景:UMR - 106 是一种源自大鼠的骨肉瘤细胞系,常被用于骨代谢、癌症生物学以及成骨细胞分化等方面的研究。该细胞对甲状旁腺激素(PTH)、前列腺素和破骨甾体等有较高的响应性,且产生碱性磷酸酶、骨钙素等骨相关蛋白,在骨生物学研究中具有重要作用。
GFP 标记:GFP 即绿色荧光蛋白,在此稳转株中,GFP 基因被导入 UMR - 106 细胞。GFP 具有能与宿主蛋白构成融合子的性质,可将其定位到特定的细胞器和膜系统中,用于对细胞生理过程、细胞动力学等进行实时观测,或直接应用于定量分析。例如,通过荧光显微镜可直接观察到细胞内 GFP 的荧光,从而对细胞进行追踪、观察蛋白定位等,避免了提纯蛋白、标记荧光染料等复杂操作。此外,GFP 作为报告基因,连接到目的基因的启动子之后,通过测定 GFP 的荧光强度可对该基因的表达水平进行检测。
Puro 抗性筛选:Puro 是嘌呤霉素(puromycin)的缩写,在细胞实验中常作为一种筛选标记。当构建稳转株时,只有成功导入并整合了包含 Puro 抗性基因以及其他目的基因(如 GFP 基因)的外源 DNA 的细胞,才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活。而未成功转染的细胞则会因缺乏 Puro 抗性而被嘌呤霉素杀死,这样就可以筛选出稳定表达外源基因的细胞株,即 UMR - 106 - GFP - Puro 稳转株。
构建方法:通常是通过慢病毒感染细胞的方法,将携带 GFP 基因和 Puro 抗性基因的外源 DNA 导入 UMR - 106 细胞中。慢病毒感染细胞后,其基因组可整合到宿主细胞的染色体上,经过合适的药物浓度进行筛选,得到外源 DNA 稳定整合到宿主染色体,并能长时间表达 GFP 的稳转细胞株。
应用领域:在细胞生物学研究中,可利用 GFP 的荧光特性,实时观察 UMR - 106 细胞在生理过程中的变化,如细胞的迁移、分化等。在癌症研究方面,由于 UMR - 106 是骨肉瘤细胞系,可借助该稳转株研究肿瘤细胞的生长、侵袭等机制,以及筛选针对骨肉瘤的潜在治疗药物,通过观察 GFP 荧光变化来评估药物对细胞的作用效果。在骨生物学研究中,可用于探究成骨细胞分化过程中相关基因的表达和调控机制等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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