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Walker/LLC-WRC 256-GFP-Puro稳转株
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详细内容
Walker/LLC-WRC 256-GFP-Puro稳转株
产品名称 | Walker/LLC-WRC 256-GFP-Puro 稳转株 |
产品货号 | XY-R1105 |
中文名称 | GFP 标记的 Walker/LLC-WRC 256 稳转株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理:通常是通过将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的表达载体,利用脂质体转染或病毒感染等方法导入 Walker/LLC - WRC 256 细胞中。经过嘌呤霉素的筛选,只有成功整合了外源基因并稳定表达 GFP 的细胞才能存活下来,从而获得 Walker/LLC - WRC 256 - GFP - Puro 稳转株。例如,利用慢病毒载体将 GFP - Puro 基因导入细胞,慢病毒可以高效地将其基因组整合到宿主细胞基因组中,实现稳定表达。
特点:
荧光标记:表达绿色荧光蛋白,在荧光显微镜下可以直接观察到细胞发出绿色荧光,便于对细胞进行实时追踪、定位和示踪。例如,在研究细胞的迁移、侵袭以及在动物体内的分布等方面,通过荧光信号可以清晰地观察到细胞的动态变化。
药物抗性筛选:具有嘌呤霉素抗性,在含有嘌呤霉素的培养基中能够稳定生长,而未成功转染的细胞则会被嘌呤霉素杀死,从而保证了培养的细胞是稳定表达 GFP 的转染细胞,有利于细胞的筛选和长期培养。
应用领域:
肿瘤生物学研究:用于观察肿瘤细胞在体内外的生长、增殖、迁移和侵袭等行为。例如,通过将稳转株接种到动物模型中,利用荧光成像技术可以实时监测肿瘤的形成和发展过程,研究肿瘤细胞的转移规律。
药物研发:可以作为药物筛选的模型,评估抗肿瘤药物对肿瘤细胞的作用效果。通过观察药物处理后细胞的荧光变化、生长抑制情况等,来判断药物的疗效和作用机制。
基因表达调控研究:借助 GFP 的表达来研究特定基因在 Walker/LLC - WRC 256 细胞中的表达调控机制。例如,将感兴趣的基因与 GFP 融合表达,通过观察 GFP 的荧光强度和分布,来了解该基因在不同条件下的表达水平和细胞内定位。
培养条件:一般使用 RPMI - 1640 培养基,添加 10% 的胎牛血清(FBS)和 1% 的青霉素 - 链霉素(P/S)来培养。培养环境为 37℃、5% 二氧化碳的细胞培养箱。在传代过程中,当细胞达到 80% - 90% 汇合度时,需要进行传代,传代比例通常为 1:2 - 1:3,以维持细胞的良好生长状态。同时,为了维持稳转株的稳定性,在培养基中需要持续添加适量的嘌呤霉素进行筛选培养。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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