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植物单线态氧检测试剂盒-红色荧光
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详细内容
植物单线态氧检测试剂盒-红色荧光
产品货号:XY9-461662
产品规格及价格:100T/1600元;200T/2700元
产品简介:
植物组织单线态氧(1O2)检测试剂盒是一种利用新型荧光探针O66进行植物组织单线态氧检测的试剂盒。本试剂盒中的66 1O2探针为绿色荧光的单线态氧探针,具有506 / 526 nm的最大激发/发射波长。
O66 1O2探针在植物组织中单线态氧存在的条件下,被氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与植物组织内单线态氧水平成正比,检测O66产物的荧光强度就可以知道植物组织内单线态氧的水平。
在激发波长506 nm,发射波长526 nm附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪等检测O66产物荧光强度,从而测定植物组织内单线态氧水平。
产品特点:
1.使用方便:可用荧光酶标仪、荧光分光光度计检测;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。

使用方法:
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.荧光探针为 DMSO 溶液,冬季气温较低时在室内时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温(20℃以上),并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
5.必须使用荧光检测专用的黑色 96 孔板。
试剂准备:
根据样本数量,用纯水将 O66 探针 10 倍稀释。充分混匀,备用。
【注】:
不可以一次性将探针全部稀释。
现配现用。
O66 探针液为 DMSO 溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
微量操作时,注意探针要有效加入匀浆液,避免没有加入。
以下步骤使用的 O66 探针为此步骤稀释过的探针。
样本处理:
1. 刚取得的新鲜植物组织样本用 PBS 洗净。
2. 准确称取 50 mg 或 100 mg 植物组织样本,加入 500 µl-1 ml 匀浆缓冲液 A,用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
3. 在 100×g,4℃离心 5 分钟,取上清备用。
样本检测:
1. 在 96 孔板中加入 190 微升匀浆上清液、10 微升 O66 探针,用移液器吹打,使之充分混匀。
【注】:
不同样本的活性氧差异较大,需要根据预实验结果调整探针用量。一般加入 2-10 µl 探针,染色终浓度按试剂盒中探针母液的 200-1000 倍稀释,200 倍稀释适合大多数样本。
如果荧光强度太强,超过了检测仪器的量程,可以减少探针用量。保证所有样本探针用量一致即可。
以酶标仪检测为例。也可以用荧光分光光度计检测,根据所使用仪器决定匀浆液体积和染色容器。
2. 在 37℃避光孵育 20-30 分钟。
3. 置于酶标仪中,后于激发波长为 506 nm、发射波长 526 nm 检测荧光强度。
【注】:
或使用荧光光度计等其它荧光检测设备。
必须使用荧光检测专用的黑色 96 孔板。
如果荧光强度太强,超过了仪器的检测范围,可以将孵育后的匀浆上清液稀释后再检测。一般稀释 5-50 倍。
蛋白定量:
1. 另取 50 微升上清匀浆液,用 PBS 大约稀释 30 倍。
2. 取 100 微升进行蛋白定量。
结果处理:
以荧光强度(RFU)/ 蛋白浓度(毫克蛋白)表示植物组织单线态氧强度。
【注】:
数据与蛋白浓度的单位无关。
此处以蛋白浓度数据作为校正系数,对不同样品进行均一化处理。
荧光强度强则单线态氧(1O2)含量高。
可以用实验中对照样本的荧光强度值为基准,待测组样本的荧光强度值占对照样本的百分比来比较单线态氧(1O2)程度差异。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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