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组织活性氧检测试剂盒(红色荧光)
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详细内容
组织活性氧检测试剂盒(红色荧光)
产品货号:XY9-460522
产品规格及价格:100T/1600元;200T/2700元
产品简介:
组织活性氧检测试剂盒(红色荧光O08)是一种利用新型荧光探针O08进行组织活性氧检测的试剂盒。本试剂盒中的O08 ROS探针为红色荧光的活性氧探针,具有516 nm / 606 nm的最大激发/发射波长。
O08 ROS探针在组织中活性氧存在的条件下,被氧化生成红色荧光物质,红色荧光强度与组织内活性氧水平成正比,检测O08产物的荧光强度就可以知道组织内活性氧的水平。
在激发波长510 nm,发射波长610 nm附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪等仪器检测O08产物荧光强度,从而测定组织内活性氧水平。
一般使用新鲜组织样本检测活性氧,反映的是组织当时的活性氧状态。冻存的组织样本的ROS在长期冻存过程中会损失掉,有条件的话就使用新鲜样本,不建议使用冻存的组织样本。已经冻存的组织样本中残余的ROS也可以用本试剂盒检测。
活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、一氧化氮(NO,Nitric oxide)、超氧阴离子(•O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)、ClO-和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果,在呼吸链中,在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应,在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧:“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2•-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B),同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C),生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D),在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH•(图1E),超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针,还可以提供绿色、蓝色、深红色荧光的活性氧检测试剂盒。
可以为您提供各种细胞样本、切片样本、组织样本的活性氧、活性氮检测试剂盒产品。
可以为您提供总活性氧、总活性氮和各种亚型的活性氧/活性氮的检测试剂盒产品。
可以为您提供各种绿色、红色、蓝色、深红色的活性氧/活性氮检测试剂盒产品。
可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
产品特点:
1.使用方便:可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。

使用方法:
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.荧光探针标记后,一定
要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
3.08 染色液为 DMSO 溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
5.原位检测必须使用荧光检测专用的黑色透明底 96 孔细胞培养板。
6.以下操作步骤仅供参考,请根据实际样本情况调整或参考文献。
试剂准备:
根据样本数量,用纯水将 O08 探针 10 倍稀释。充分混匀,备用。
样本处理:
1. 刚取得的新鲜组织样本用 PBS 洗净。
2. 准确称取 50 mg 或 100 mg 组织样本,加入 500 µl-1 ml 匀浆缓冲液 A,用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
3. 在 100×g,4℃离心 5 分钟,取上清备用。
样本检测:
1. 在 96 孔板中加入 190 微升匀浆上清液、10 微升 O08 探针,用移液器吹打,使之充分混匀。
2. 在 37℃避光孵育 20-30 分钟。
3. 置于酶标仪中,激发波长为 488-535 nm、发射波长 606 nm 检测荧光强度。
蛋白定量:
1. 另取 50 微升上清匀浆液,用 PBS 大约稀释 30 倍。
2. 取 100 微升进行蛋白定量。
结果处理:
以荧光强度(RFU)/蛋白浓度(毫克蛋白)表示组织活性氧强度
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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