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JC-1

MCE 国际站：JC-1

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-15534

CAS 号：3520-43-2

生物活性： JC-1 (CBIC2) 是一种理想的荧光探针，广泛用于检测线粒体膜电位。JC-1 以电位依赖的方式在线粒体中积累，可用于检测细胞或纯化线粒体的膜电位。在正常线粒体中，JC-1 在线粒体基质中聚集形成聚合物，发出强烈的红色荧光（激发波长 585 nm，发射波长 590 nm）；当线粒体膜电位较低时，JC-1 无法在线粒体基质中聚集，产生绿色荧光（激发波长 510 nm，发射波长 527 nm）[1]。

体外研究(In Vitro)：指南 (以下为我们推荐的实验方案。本方案仅作为参考指南，具体操作应根据您的实际需求进行调整)。JC-1 染色液的配制： 1.1 制备储存液 用 DMSO 配制 5 mg/mL 的 JC-1。如用 1 mL DMSO 溶解 5 mg JC-1。 注：1) JC-1 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。 1.2 工作液的配制 (此方法已通过 MCE 验证。) 按照 0.1% DMSO + 89.9% ddH2O + 10% 10x PBS (HY-K3006) 依次稀释，配制成 1-5 µg/mL 的 JC-1 工作液。以 1 mL 的 5 µg/mL 的工作液为例，从 5 mg/mL 的 JC-1 储存液中取出 1 µL 至管中，加入 899 µL ddH2O 充分混匀，再向上述体系中加入 100 µL 10x PBS 充分混匀。 注：1) JC-1染料需要即配即用，放置一段时间可能会析出；尽量在避光条件下配制使用； 2) 依次稀释的每一步都要充分混匀至澄清，必要时可以辅助 37℃ 超声助溶； 3) 请不要直接使用 1x PBS (HY-K3005) 或无血清的培养基稀释至工作液，否则会导致严重析出； 4) 如果 JC-1 进入细胞的效果不好，可向工作液中加入适量 20% Pluronic F127 溶液，终浓度为 0.02-0.05%，Pluronic F127 可以防止 JC-1 在缓冲液中聚合并帮助其进入细胞。 JC-1 染色: 1) 以 6 孔板为例进行细胞铺板，密度为 5×105 cells/mL。37℃，5% CO2 培养箱培养过夜。 注：进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过 1×106/mL，也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。 2) 取 0.5 mL 细胞悬液至无菌的离心管内。 3) 400 g 离心 3-5 min；弃上清。 4) 用 1 mL JC-1 工作液重悬细胞，于 37℃，5% CO2 培养箱孵育 15-30 min。 5) 室温条件 400 g 离心 5 min；吸掉上清。 6) 用 2 mL 细胞培养液或者缓冲液重悬细胞，之后室温条件 400 g 离心 5 min；弃上清，重复两次。 7) 用 1 mL 新鲜培养液或者缓冲液重悬细胞，立刻进行后续的流式分析或荧光显微镜观察。 8) 数据分析 (流式细胞仪) ：含有红色 JC-1 聚集物的健康细胞线粒体用 FL2 通道检测；含有绿色 JC-1 单体的凋亡或不健康细胞用 FL1 (FITC) 通道检测。 注：若用于酶标仪检测，用 300 µL 缓冲液重悬细胞；然后按照每孔 100 µL 的量将染色好的细胞转移到不透光的 96 孔板内，即可进行荧光酶标板分析。 MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 仅供参考。

分子量：652.23

Formula：C25H27Cl4IN4

性状：固体

颜色：Purple to purplish red

Emission (Em)：527/590

Excitation (Ex)：510/585

运输条件：美国大陆地区的室温；其他地区可能有所不同。

储存方式： 4°C，密封保存，避光防潮 *溶剂保存：-80°C，6个月；-20°C，1个月（密封保存，避光防潮）

染色示例：描述：JC-1 (CBIC2) 可用于分析线粒体膜（红色和绿色荧光分别代表 JC-1 的聚集体和单体形式）。
方法：用于细胞染色。
1. 将细胞培养于 24 孔板中 24 小时。
2. 弃去培养基，将细胞与 JC-1 孵育（20 分钟；37°C；避光）。
3. 用 HBSS 洗涤染色细胞，并在荧光显微镜（Invitrogen EVOS M5000，美国）下观察细胞形态。描述：JC-1 (CBIC2) 可用于测量线粒体膜电位（红色和绿色荧光分别代表 JC-1 的聚集体和单体形式）。描述：JC-1 (CBIC2) 可用于测量线粒体膜电位（红色和绿色荧光分别代表 JC-1 的聚集体和单体形式）。
方法：用于细胞染色。
1. 将培养细胞与 JC-1 (5 µg/mL；20 分钟；避光) 孵育。
2. 分别使用流式细胞仪 (BD FACSCanto II) 和荧光显微镜 (Axio Observer，德国) 观察荧光。描述：JC-1 (CBIC2) 可用于测量线粒体膜电位（红色和绿色荧光分别代表 JC-1 的聚集体和单体形式）。
方法：用于细胞染色。
1. 将细胞与 JC-1 (0.5 mL；5 mg/mL；20 分钟；37°C) 在 CO2 培养箱中孵育。
2.用 0.02 M PBS 洗涤细胞两次，然后使用激光共聚焦显微镜（Leica TCS SP8，德国）和流式细胞仪（Aira II，美国）进行分析。说明：JC-1 (CBIC2) 可用于测量线粒体膜电位（红色和绿色荧光分别代表 JC-1 的聚集体和单体形式）。方法：用于细胞染色。1. 将细胞与 JC-1 孵育（20 分钟；37°C）。2. 成像前用 PBS 洗涤细胞三次，并使用共聚焦激光扫描显微镜采集荧光图像并进行强度分析。

文献引用：MCE 顾客使用本产品发表 238 篇科研文献

提供质量检测报告：Data Sheet、SDS、COA、HNMR、LCMS、产品使用指南

产品活性：JC-1 (CBIC2) 是一种广泛用于检测线粒体膜电位的理想荧光探针。JC-1 染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内，可以用来检测细胞或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内，JC-1 聚集在线粒体基质中形成聚合物，聚合物发出强烈的红色荧光 (Ex=585 nm, Em=590 nm) ；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，产生绿色荧光 (Ex=510 nm, Em=527 nm) 。

相关产品：JC-1 (solution) | 2-NBDG | 2-NBDG (solution) | H2DCFDA | Dihydroethidium (solution) | PEG1000000 | PEG200000 | PEG5000000 | PEG8000000 | TMRE (solution) | PEG300 | PEG400

热门产品线：抑制剂 | 稳定性同位素标记物 | 脂质 | 糖类

Trending products：Inhibitors | Isotope-Labeled Compounds | Lipids | Saccharides

参考文献：
[1]. A Perelman, et al. JC-1: alternative excitation wavelengths facilitate mitochondrial membrane potential cytometry. Cell Death Dis. 2012 Nov 22;3:e430.
[2]. Vera C. Keil, et al. Ratiometric high-resolution imaging of JC-1 fluorescence reveals the subcellular heterogeneity of astrocytic mitochondria. Pflügers Archiv - European Journal of Physiology. 2011,462(5): 693⁻⁷08.
[3]. Jung-Ho LEE, et al. Real-time analysis of amyloid fibril formation of α-synuclein using a fibrillation-state-specific fluorescent probe of JC-1. Biochem. J. 2009, 418:311-323.
[4]. Salvioli S, et al. JC-1, but not DiOC6(3) or rhodamine 123, is a reliable fluorescent probe to assess delta psi changes in intact cells: implications for studies on mitochondrial functionality during apoptosis. FEBS Lett. 1997 Jul 7;411(1):77-82.