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罗丹明标记鬼笔环肽

MCE 国际站：Rhodamine Phalloidin

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K0903

中文名称：罗丹明标记鬼笔环肽

存储条件：-20°C可稳定储存至少6个月避光保存，避免反复冻融

产品活性：MCE 罗丹明标记鬼笔环肽是一种高亲和的 F-肌动蛋白探针，与橙色染料四甲基罗丹明 (TRITC) 偶联。

生物活性：鬼笔环肽 (Phalloidin) 是从鬼笔鹅膏中分离到的一种环状七肽毒素，以极高的亲和力和特异性结合肌动蛋白丝 F-actins (actin filaments)。通常将鬼笔环肽与荧光染料偶联来研究细胞中 F-actins 的分布。荧光标记的鬼笔环肽极少会非特异性染色，染色和未染色区域之间的对比度非常大，可使 F-actins 高效染色。 MCE 提供 3 种荧光标记的鬼笔环肽 (1000× Stock Solution in DMSO)，AMCA Phalloidin (HY-K0901，蓝色荧光)、Fluorescein Phalloidin (HY-K0902，绿色荧光)和 Rhodamine Phalloidin (HY-K0903，橙色荧光)。这些鬼笔环肽衍生物可发出稳定、高亮度的荧光，染色反应特异性强，对比性高，适用于 F-actins 的定性和定量检测实验。

操作流程：1. 准备 1× 荧光标记鬼笔环肽工作液 吸取 1 μL 1000× 荧光标记鬼笔环肽储存液到 1 mL 含有 1% BSA 的 PBS 缓冲液中即可得到 1× 工作液。 注：a. 不同细胞染色情况不同，相应荧光标记鬼笔环肽的使用量需根据不同情况调整。 b. 1% BSA 的使用是为了降低非特异性的背景染色。 2. 细胞染色步骤 2.1 用 PBS 清洗细胞 2-3 次。用含有 3.7％ 甲醛的 PBS 溶液固定细胞，冰上固定 15 分钟。 Note: 甲醇可以在固定过程中破坏肌动蛋白。因此最好避免含有任何甲醇的固定剂。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。 2.2 用 PBS 清洗细胞 2-3 次。 2.3 可选步骤：室温下，用含 0.1％ Triton X-100 的 PBS 溶液透化细胞 3-5 分钟，增加其通透性。用 PBS 清洗细胞 2-3 次。 2.4 按 100 μL/孔 (96 孔板)的加入量加入 1× 荧光标记鬼笔环肽工作液，室温避光染色 20-90 分钟。 2.5 用 PBS 清洗细胞 2-3 次，去除多余的荧光标记鬼笔环肽。 2.6 按每种荧光标记鬼笔环肽的最佳推荐激发/发射波长，于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察 (AMCA Phalloidin, Ex/Em=344/432 nm；Fluorescein Phalloidin, Ex/Em= 497/516nm； Rhodamine Phalloidin, Ex/Em= 552/578 nm)。

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