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质粒转化步骤-质粒载体网

提供者:智立中特(武汉)生物科技有限公司   发布时间:2022/3/22 14:59:39  阅读次数:301次  进入该公司店铺

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一、操作步骤:

1. 从-80℃冰箱中取出对应的感受态细胞,室温下置于冰盒上解冻,标记;

2. 向感受态细胞中加入2μl的质粒,置于4℃冰箱中,冰浴30min;

3. 在42℃水浴锅中热激1min,然后立即在冰盒上放置2min;

4. 每管加900μl LB培养基,37℃摇床震荡,150rpm×45min;

5. 取100μl 转化液加入对应抗性的平板中,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

6. 将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养过夜。

二、注意事项:

1. 感受态可用灭菌的离心管分装使用。

2. 根据需要在第5步骤时将转化液6000rpm离心3min,然后只留下100μl左右的上清液,混匀沉淀,全部加入相对应的平板中。

3. 转化过程在超净工作台中进行.

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