产品介绍

AF647 ECL是将从刺桐（Erythrina Cristagalli）种子中天然提取纯化的刺桐凝集素，与Alexa Fluor 647荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性远红光区标记科研试剂。它完整保留了刺桐凝集素对α2,8-唾液酸化神经氨酸残基的高亲和力识别特性，依托Alexa Fluor 647染料优化的多甲川花菁骨架，兼具超高摩尔消光系数与的远红光穿透能力，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步透析与尺寸排阻层析去除未反应的游离染料，解决了传统远红标记凝集素非特异性吸附高、厚样本成像背景深的痛点。试剂为深紫红色至蓝紫色冻干品，在中性生理缓冲液中溶解分散性，是远红光区开展厚样本糖链研究的标杆级高穿透工具。

基础参数

中文名称：AF647标记刺桐凝集素，AF647-刺桐凝集素

英文名称：AF 647 ECL，Alexa Fluor647-ECL，AF647-Erythrina Cristagalli Lectin

外观状态：深紫红色至蓝紫色冻干品

荧光光谱参数：最大激发波长约650 nm，发射波长约668 nm，完美适配633 nm/647 nm激光线与Cy5标准滤光片组

储存条件：-20℃避光密封干燥长期保存，避免反复冻融，复溶后建议分装为单次使用量，操作全程严格避光，避免接触含游离巯基的高浓度缓冲液，防止荧光基团发生分解

用途：唾液酸化糖链远红光区荧光标记，厚组织样本三维成像，活体近红外窗口示踪，高灵敏度单分子检测

作用机理

AF647 ECL中的刺桐凝集素以天然活性四聚体形式存在，整体分子量约240 kDa，各亚基表面都带有独立的糖结合结构域，通过多残基协同的氢键网络，特异性识别并结合样本中α2,8-唾液酸化神经氨酸残基，对该类特征唾液酸修饰具有高选择性。AF647荧光基团通过稳定的酰胺键锚定在ECL蛋白表面远离糖结合口袋的赖氨酸残基上，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在650nm波长激发下，偶联在蛋白上的AF647基团可发射出明亮的668nm远红荧光，该波段处于生物样本自发荧光极低的光谱窗口，可大幅降低背景干扰，实现超高信噪比成像。

应用领域

AF647 ECL可用于厚组织样本三维成像，依托其远红光高穿透特性，在共聚焦或双光子显微镜下对几十至上百微米厚度的组织样本进行逐层扫描，清晰获得深层细胞表面唾液酸化糖链的三维空间分布图谱。该试剂可应用于高灵敏度单分子检测，凭借其极高的单分子亮度，在单分子成像体系中直接追踪单个糖蛋白分子的动态运动过程，解析糖基化修饰对分子运动行为的调控机制。同时它也适用于高维度多色实验搭建，作为经典远红通道探针与其他多个波段的标记物联合使用，轻松搭建4色及以上的低串扰多色荧光体系，为糖生物学相关非医疗方向研究提供高灵敏度的远红标记工具。

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