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信帆供应:组织自发荧光淬灭试剂

提供者:上海信帆生物科技有限公司   发布时间:2026/9/21 11:41:24  阅读次数:176次  进入该公司店铺

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信帆供应:组织自发荧光淬灭试剂

信帆生物主营产品: 质控样品,干扰物质,抗体抗原,elisa试剂盒,动物血制品,生化试剂盒等。实验代做服务:HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR)、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等。

一、产品原理与特点

各类组织及细胞样本会产生内源自发荧光,该荧光可穿透多波段滤光片,干扰特异性荧光信号观察,严重时会直接造成免疫荧光染色实验失败。本试剂含专用离子组分,依靠分子碰撞捕获内源荧光分子的激发态电子,阻止电子回落基态释放荧光能量,以此消除样本背景自发荧光。合理控制孵育时长,可大程度清除背景杂荧光,同时对抗体标记的特异性荧光损耗较低。

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二、储存条件与适用样本

储存条件:2~8℃避光保存

适用样本:各类组织、细胞免疫荧光染色的自发荧光消除,推荐神经组织去除自发荧光使用。

三、标准操作步骤

提醒:本试剂必须在整套免疫荧光染色操作全部完成后再使用,染色前添加会大幅破坏特异性荧光信号。不同组织、细胞需摸索适配孵育时长,平衡背景淬灭效果与靶标荧光强度。

1. 吸弃样本表面PBS洗涤液,使用蒸馏水快速冲洗组织切片或培养板中的细胞;

2. 加入足量自发荧光淬灭试剂,完全覆盖样本,室温孵育10-90分钟;

3. 吸除试剂废液,蒸馏水短时冲洗样本;

4. 吸去蒸馏水,加入PBS浸润覆盖样本;

5. 封片:建议搭配抗荧光衰减封片剂使用,减缓特异性荧光信号衰退;

6. 放置荧光显微镜下观察成像。

四、注意事项

1. 不同物种、不同器官组织的内源荧光特性存在差异,试剂处理效果会略有区别。所有自发荧光淬灭处理都会轻微降低抗体标记荧光强度,但本试剂清除背景荧光的效果远高于靶标荧光损耗,可实现良好的信噪比。试剂对脑脊髓神经组织适配效果佳。

2. 孵育时间优化方案:正式实验前取多份相同切片或细胞样本,染色完成后分别设置5min、10min、30min、60min、90min梯度孵育,冲洗后镜检判断效果。 若样本背景自发荧光依旧明显,可延长孵育时长;若孵育不足10分钟就出现靶标荧光明显减弱,可缩短孵育至1-5分钟,也可将试剂与等体积纯水1:1稀释后,在10-90分钟区间重新摸索孵育条件。

3. 使用顺序要求:组织自发荧光淬灭试剂必须在完成免疫荧光组化染色后使用,否则将严重降低抗体荧光。


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