信帆生物提供：大鼠肿瘤坏死因子(TNF-a )实验技术服务

肿瘤坏死因子α（TNF-α）是关键促炎细胞因子，主要由巨噬细胞、单核细胞、T 细胞等产生。可激活内皮细胞，诱导多种炎症介质释放，招募免疫细胞，参与清除病原体与肿瘤监视。TNF-α过量分泌会驱动持续性炎症，介导组织损伤，参与类风湿关节炎、银屑病、炎症性肠病等自身免疫病。

检验原理（仅供参考）：

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠肿瘤坏死因子 α（TNF-α）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中大鼠肿瘤坏死因子 α（TNF-α）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

产品性能指标：

1. 检测范围：10 pg/mL – 320 pg/mL。

2. 灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15%。

样品收集、处理及保存方法：

以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最-后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

注：标本溶血会影响最-后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。