肺吸虫IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

说明书

【产品名称】

通用名：肺吸虫IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

【包装规格】192人份/盒

【预期用途】

该产品用于定性检测人血清或血浆中存在肺吸虫IgG抗体。

【检验原理】

试剂盒微孔板涂有来自肺吸虫抗原，在与稀释的患者血清的次孵育期间，任何与抗原发生反应的抗体都会与包被的孔结合。清洗除去样品的其余部分后，添加酶缀合物。如果抗体已与孔结合，则酶结合物将与这些抗体结合。另一系列洗涤后，添加色原（四甲基联苯胺或TMB）。如果存在酶结合物，过氧化物酶将催化消耗过氧化物的反应，并将色原从透明变为蓝色。添加终止溶液终止反应并将蓝色变为亮黄色。然后可以目视或使用ELISA酶标仪读取OD值。生物素系统（biotin-avidinsystem）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高

【主要组成成份】

【贮存条件及有效期】

2-8℃密封保存，避免冻结。有效期12个月。

【适用仪器】

各类国产和进口酶标仪均可使用，检测波长450nm。

【样本要求】

1、尽量用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光），避免反复冻融（3次以上）。

2、避免用溶血、混浊或脂血标本。

3、样本若需运输，应保持2-8℃或冻存状态。

4、标本中避免加入抗凝剂或保护剂或防腐剂，以免影响试验结果。

【检验方法】

1、试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。

2、将浓缩洗涤液用蒸馏水1：20稀释待用（如：1ml浓缩洗涤液---19ml蒸馏水）。

3、加样：将待检标本用标本稀释液1：100稀释（如：5ul标本---495ul标本稀释液），于反应板中加已稀释待检标本及阴、阳性对照（100ul）各一孔；设空白对照一孔（加100ul标本稀释液）轻拍混匀。

4、孵育：室温温育30分钟。

5、洗板：甩去孔内液体，每孔加满（或350ul）洗涤液，静置10-15秒，甩净，在吸水纸上拍干，同法连续洗板5次或使用自动化设备前需要设置好对应参数。

6、加酶结合物：每孔100ul，混匀后置室温温育10分钟。同上法洗涤5次并拍干。

7、显色：每孔加显色剂TMB100ul，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置室温10分钟。

8、终止：每孔加入终止液100ul，轻拍混匀（或震荡器混匀）。

9、结果判读：酶标仪双波长450nm/620-650nm读取数值，其中450nm为主波长。

【检验结果的解释】

1、目测：在白色背景下观察各孔显色情况，黄色者为阳性，无色者为阴性。

2、酶标仪测定：每孔加终止液100ul，混匀后在450nm波长下以空白孔调零后测定各孔O.D值。A、阴性对照OD≤0.15；阳性对照OD≥0.50；临界值OD=阴性对照平均值+0.25

阳性标本：S/CO≥1.5；灰区标本：1.2≤S/CO＜1.5；阴性标本S/CO＜1.2

阴性对照OD值≤0.15，阳性对照≥0.50以上实验结果成立，否则实验可能产生偏差，需重新试验。

【阳性判断值或者参考区间】

正常健康人应为阴性。即待测标本S/CO值≥1.5为阳性。

【检验方法的局限性】

1、本试剂盒检测结果只作为辅助诊断，疾病的确诊需要结合临床症状/体征和其他检查方法方可做出判断。

【产品性能指标】

1、灵敏度：检测22份阳性标本，检测结果为阳性有21份，灵敏度为95%。

2、特异性：检测86份阴性标本，检测结果为阴性有86份，灵敏度为100%。

3、批内差：同一批次的试剂，对一份阳性血清进行测定，各板孔对测定结果的变异系数小于15%。

【注意事项】

1、试剂盒仅供体外诊断用。

2、微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃短期

内用完。

3、滴加试剂前应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

4、洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

5、试剂置2-8℃存放，不能冻结。

6、本试剂盒中阴阳性对照虽不含人源性血清成分，但应严格按常规作为污染物处理。

【参考文献】