鸡（Chicken）D-乳酸（D-LA）ELISA检测试剂盒

鸡 D - 乳酸（D-LA）ELISA 检测试剂盒是一种用于检测鸡体内 D - 乳酸含量的工具，以下是其详细介绍：

检测原理：基于双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒中包含针对鸡 D - 乳酸的特异性抗体，首先将捕获抗体包被在酶标板上，当加入待检测样本后，样本中的 D - 乳酸会与包被抗体结合，形成抗原 - 抗体复合物。然后加入生物素标记的检测抗体，它会与结合在包被抗体上的 D - 乳酸进一步结合，形成双抗体夹心结构。加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，链霉亲和素与生物素特异性结合，再加入显色底物 TMB，在辣根过氧化物酶的催化下，TMB 显色，通过酶标仪测定吸光度，根据吸光度值与标准曲线比较，即可计算出样本中 D - 乳酸的含量。

试剂盒组成：通常包含酶标板、标准品、生物素标记的检测抗体、洗涤液、辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素、显色底物 TMB 和反应终止液等。

适用范围：适用于检测鸡的血清、血浆、组织匀浆等样本中的 D - 乳酸含量。

检测范围：其线性范围可能在 0.02-1mM 左右，具体需参考相应试剂盒的说明书。

灵敏度：灵敏度通常较高，能检测到低至 20µM 的 D - 乳酸浓度。

操作步骤：

从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温 (20 - 25℃)。

对标准品进行梯度稀释，制备一系列浓度梯度的标准品工作液。

对检测样本进行必要的预处理，如离心去除杂质等，并根据需要进行适当稀释。

分别将标准品工作液和检测样本加入酶标板的对应孔中，每孔加入量一般为 100μl，37℃恒温避光孵育一定时间，如 90 分钟。

弃去孔内液体，用洗涤液洗涤酶标板，一般洗涤 5 次，每次 30 秒，然后拍干。

加入生物素化抗体工作液，每孔 100μl，37℃恒温避光孵育 60 分钟。

重复洗涤步骤。

加入酶结合物工作液，每孔 100μl，37℃恒温避光孵育 30 分钟。

再次洗涤。

加入显色底物 TMB，每孔 100μl，37℃恒温避光孵育 15 分钟。

加入反应终止液，每孔 100μl，终止显色反应。

立即用酶标仪在特定波长下，如 450nm 处测定吸光度值。

根据标准品的吸光度值绘制标准曲线，再根据样本的吸光度值从标准曲线上查得对应的 D - 乳酸浓度，并结合样本稀释倍数计算出实际含量。

注意事项：

实验操作应严格遵循无菌操作原则，防止微生物污染。

试剂使用前应充分混匀，避免产生气泡。

洗涤过程要充分，以减少非特异性结合，但要避免过度洗涤导致抗体损失。

不同批次的试剂盒可能存在差异，尽量使用同一批次的试剂盒进行实验。

样本保存和处理应得当，避免反复冻融，若样本为组织匀浆，应确保匀浆充分。