1. 抗体药物概述Antibody Drugs

抗体类药物由于其特异性高、不良反应性低且可以针对特定靶点定向制备等优点，已成为近年来新药开发领域的中坚力量。自1986年Orthoclone OKT3获批以来，至今已有超过100种单克隆抗体(mAbs)被美国食品药品监督管理局(FDA)批准，适应症也逐步扩展，覆盖肿瘤、自身免疫性疾病、血液疾病、传染病和中枢神经系统疾病等多种疾病。抗体药物市场的销售额也在逐年攀升，诞生了多个销售额超过百亿美元的重磅药物。

图1. 抗体类药物数量爆发式增长

2. 抗体药物制备流程Antibody Drugs

抗体药物制备的一般流程包括靶点确认、抗体类型确认（单抗、双抗或ADC等）、抗原制备及免疫（抗原类型、动物类型选择）、抗体筛选制备（制备技术的选择）、抗体优化、成药性评估、动物模型评估、稳定株开发、工艺开发及生产、临床前评估、临床验证及产业化等。

图2. 抗体药物开发流程

3. 杂交瘤技术Hybridoma Technology

抗体药物的发展，得益于抗体制备技术的进步。杂交瘤技术自1975年被发现以来，由于其技术路线成熟、可进行多种功能性介入筛选、成本低、易操作等优点，一直作为抗体发现常用的技术，目前获批的相当比例的抗体类药物为采用杂交瘤技术筛选获得的。

图3.义翘杂交瘤技术抗体制备流程

利用杂交瘤技术进行成药性抗体筛选时需要注重几个关键技术环节：

1 免疫原的选择

具有生物活性的高纯度重组蛋白

①免疫剂量明确，免疫效果相对稳定

②血清筛选和抗体筛选可实现高通量

③获得抗体针对的靶点相对明确

④表达存在技术挑战，蛋白不易获得，或表达获得的蛋白结构与天然蛋白存在差异

选择非蛋白类特殊抗原（DNA、细胞等）免疫作为有效补充手段

①解决蛋白难表达的问题，免疫原更接近天然蛋白

②需要提升免疫反应强度，后期筛选鉴定相对困难

2 免疫方案的设计

总体原则：因靶点和需求而异，考虑时间和资金成本平衡

①增加早期投入力度，获得更多候选抗体，应对下游高淘汰率

②动物选择

③品系选择：BALB/c、C57BL/6、SJL、转基因小鼠等

④数量选择：靶点之间免疫效果差异较大，考虑动物个体差异，建议每组不少于10只动物

免疫佐剂、剂量、周期、途经

以常规标准方案为基础，根据初步免疫原性评估和历史经验，制定个性化方案（弱反应增加剂量、淋巴结免疫、调整佐剂增加多样性等）①免疫佐剂：包括弗氏佐剂、铝佐剂、MF59、QS21等

②免疫途径：包括皮内、皮下、腹腔、静脉、淋巴结、脾内等

3 高效融合及筛选

融合效率：提升抗体制备效率，融合效率是关键因素之一，传统PEG融合，对细胞伤害大，融合效率低，不利于后续筛选到好的抗体。电融合技术对于细胞伤害小，融合效率高，扩大了筛选到更好多样性抗体的范围，为后续筛选到好的成药性候选抗体提供了更多可能。

相同脾细胞量图：义翘对比PEG融合与电融合效率结果

介入筛选：筛选阶段除了常规基础的ELISA筛选，增加竞争筛选、流式筛选、细胞筛选等介入筛选，可以更早的排除非目标应用抗体，缩小抗体范围，高效鉴别出目标克隆，减少后续的工作量及成本。

义翘神州杂交瘤技术平台Hybridoma Technology

义翘神州拥有>10年抗体制备经验，可以提供从抗原制备到抗体筛选及鉴定的一站式服务。抗体制备有杂交瘤技术、噬菌体展示技术、单B细胞流式分选技术、单B细胞Beacon技术可以选择，均有众多成功案例。针对经典的杂交瘤平台，义翘神州做了的优化，拥有>19000株抗体成功制备经验。

平台优势

免疫多样化

①6500+种现货蛋白选择，打包抗体制备服务价格特殊优惠

②多种免疫原选择：多肽、蛋白、DNA、细胞等

③多种免疫方式：皮下、腹腔、脾脏等

④多品系小鼠选择：BALB/c、C57BL/6、SJL小鼠等

⑤多方案选择：常规与快速（最快60天即可拿到抗体）

技术化

①多种佐剂选择

②高效的电融合技术：较PEG融合效率高3-5倍

③高通量有限稀释技术

④杂交瘤体外无血清培养技术

服务个性化

①多节点介入筛选：血清、主克隆、亚克隆阶段

②多种检测平台：ELISA、FACS、WB、IHC、IF、Biacore、Cell assay等

③梯度报价，按工作量收费

④专业项目经理跟进及沟通反馈

服务列表

中和抗体制备服务

抗独特型抗体制备服务

标准鼠单抗制备服务

快速鼠单抗制备服务

WB/IHC 抗体制备服务

案例展示

良好细胞活性的鼠单抗

Fig 1.利用杂交瘤技术筛选获得的鼠单抗，具有良好的抑制细胞增殖作用

抗独特型鼠单抗

Fig 2.利用杂交瘤技术筛选获得的多株抗独特型鼠单抗，特异性良好

流式应用鼠单抗

Fig 3.利用杂交瘤技术开发的CD45RA抗体

IHC应用鼠单抗

Fig 4.1:30倍稀释的鼠单抗，在人睾丸组织IHC验证阳性

详细信息可查看义翘神州官网https://cn.sinobiological.com/，或者可加“sinobio2023”进行联系。