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Sanguinarine (chloride) | 氯化血根碱

MCE 国际站：Sanguinarine (chloride)

中文名：氯化血根碱

CAS：5578-73-4

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：4°C, sealed storage, away from moisture ａnd light

生物活性：Sanguinarine (Sanguinarin) chloride 是一种苯并菲啶生物碱，来源于 Sanguinaria Canadensis 的根部，可通过激活活性氧 (ROS) 的产生来刺激细胞凋亡。 Sanguinarine 诱导的细胞凋亡与 JNK 和 NF-κB 的激活有关。 IC50 和靶标：细胞凋亡^[1]体外：血根碱 (SANG) 诱导的细胞凋亡与 JNK 和 NF-κB 的激活有关信号通路。为了确定血根碱对细胞活力的影响，用不同浓度的血根碱刺激 22B-cFluc 细胞 24 小时，然后进行 CKK-8 测定。 Sanguinarine 治疗以剂量依赖性方式降低 22B 细胞的增殖。同时，测量用不同剂量的血根碱处理的 22B-cFluc 细胞的胞质提取物，以使用 Ac-DEVD-pNA（一种经过验证的 caspase-3 底物）检测细胞 caspase-3 活性。 450 nm 处的吸光度呈剂量依赖性增加，表明 Sanguinarine^[1] 刺激 caspase-3 活性增加。 体内：为了评估血根碱 (SANG) 在体内诱导的细胞凋亡，将 22B-cFluc 细胞皮下接种到裸鼠的一侧腹腔，并允许建立异种移植模型.用 10 mg/kg 的 Sanguinarine 静脉内处理小鼠。在处理后 24、48 和 72 小时，在给小鼠腹腔注射 150 mg/kg D-荧光素底物后进行生物发光成像。早在初始处理后 48 小时，Sanguinarine 处理就会引起发光信号的明显增加。在整个实验过程中观察到持续的生物发光成像 (BLI) 强度增加。处理后72小时，收集肿瘤并进行TUNEL染色以评估细胞凋亡。与对照肿瘤相比，用 Sanguinarine 治疗的组表现出明显更多的细胞凋亡，表现为散发的凋亡细胞的绿色信号增加^[1]。

体外：血根碱 (SANG) 诱导的细胞凋亡与 JNK 和 NF-κB 信号通路的激活有关。为了确定血根碱对细胞活力的影响，用不同浓度的血根碱刺激 22B-cFluc 细胞 24 小时，然后进行 CKK进行-8测定。 Sanguinarine 治疗以剂量依赖性方式降低 22B 细胞的增殖。同时，测量用不同剂量的血根碱处理的 22B-cFluc 细胞的胞质提取物，以使用 Ac-DEVD-pNA（一种经过验证的 caspase-3 底物）检测细胞 caspase-3 活性。 450 nm 处的吸光度呈剂量依赖性增加，表明 Sanguinarine^[1] 刺激 caspase-3 活性增加。

体内：为了评估体内由血根碱 (SANG) 诱导的细胞凋亡，将 22B-cFluc 细胞皮下接种到裸鼠的一侧，并允许建立异种移植模型。用 10 mg/kg 的 Sanguinarine 静脉内处理小鼠。在处理后 24、48 和 72 小时，在给小鼠腹腔注射 150 mg/kg D-荧光素底物后进行生物发光成像。早在初始处理后 48 小时，Sanguinarine 处理就会引起发光信号的明显增加。在整个实验过程中观察到持续的生物发光成像 (BLI) 强度增加。处理后72小时，收集肿瘤并进行TUNEL染色以评估细胞凋亡。与对照肿瘤相比，用 Sanguinarine 治疗的组表现出明显更多的细胞凋亡，表现为散发的凋亡细胞的绿色信号增加^[1]。

激酶试验：使用 caspase-3 活性测定试剂盒测量 caspase-3 活性。简而言之，收集经不同浓度血根碱（0.5 μM、1 μM、2 μM、4 μM）或对照 DMSO 处理的细胞，洗涤并在冰上裂解缓冲液中裂解 30 分钟。然后以 1,2000 rpm 离心 10 分钟收集上清液。将 Ac-DEVD-pNA (2 mM) 添加到每个样品中并在 37°C 下孵育 1 小时。最后使用分光光度计在 405 nm 波长处对每个样品的光密度 (OD) 进行定量。 p-NA 标准品用于校准每个样品的 caspase-3 活性[1]。

细胞试验：使用细胞计数试剂盒 8 通过 CCK-8 测定法测定血根碱的细胞活力。简而言之，将22B-cFluc细胞接种于96孔板（5×103个细胞/孔）中，并用不同浓度的血根碱（0.5μM、1μM、2μM、4μM）处理24小时。然后每孔加入 10 mL CKK-8，孵育 4 小时，并用酶标仪测量 450 nm 处的吸光度。确定光密度 (OD) 值以反映每个孔中的活细胞群[1]。

动物体内实验:小鼠[1] 通过将悬浮于PBS中的1×107个22B-cFluc细胞注射到裸鼠(n=6)中来制备异种移植肿瘤模型。当肿瘤体积达到约 100 mm3 后，将血根碱 (10 mg/kg) 静脉注射到小鼠体内。注射24小时、48小时和72小时后，给小鼠腹腔注射单次150mg/kg D-荧光素，并使用Xenogen Lumina II系统进行生物发光成像。使用Living Image 软件4.1 表示感兴趣区域的信号强度。对于抗肿瘤治疗研究，一组荷瘤小鼠 (n=6) 在整个实验期间每隔一天静脉注射 10 mg/kg 血根碱，而对照组小鼠 (n=6) 仅接受 DMSO 。计算肿瘤生长测量值[1]。

研究领域：Apoptosis | Autophagy | Anti-infection

作用靶点：Apoptosis | Autophagy | Bacterial | Parasite

参考文献：

[1]. Wang Y, Noninvasive bioluminescence imaging of the dynamics of sanguinarine induced apoptosis via activation of reactive oxygen species. Oncotarget. 2016 Apr 19;7(16):22355-67.