实验材料：
-80℃ 冷冻 75 天的抗凝全血；预先按 500 µl 血样比 1 ml Buffer L9 的比例加入 Buffer L9 的同一个抗凝全血样本作为对照组（备注：Simgen 全血总 RNA 试剂盒中的 Buffer L9 与抗凝全血预混后可在-20℃ 长期冻存，RNA 不会降解）。

实验试剂：
全血总 RNA 试剂盒（simgen，Cat.No.5201050）、
cDNA 第一链合成试剂盒（simgen，Cat.No.7306025）、
2×SYBR Green PCR Mix（simgen，Cat.No.7106100）、
人 β-actin 引物（Forward TGACGTGGACATCCGCAAAG
/Reverse： CTGGAAGGTGGACAGCGAGG）

实验方法：
1. 分两组进行对比实验，每组各做两管：第一组取 2 个 2 ml 离心管，各加入 500 µl 新鲜全血，编号 1、2；第二组加入 500 µl 新鲜全血后再加入 1 ml Buffer L9，混合均匀，编号 3、4。将两组样本置于 -80℃ 冻存，冻存 75 天。
2. 75 天后取出后置于室温，待血样全部融化后，向 1、2 中加入 1 ml Buffer L9 混合均匀；
3. 13000 rpm 离心 10 分钟；
4. 吸取 700 µl 离心上清转移到装有 500 μl 无水乙醇的 1.5 ml 离心管中，混匀；
5. 分两次将混合液转移到核酸纯化柱中，离心去滤液；
6. 依次用 500 µl Buffer WA 和 700 µl Buffer WBR 各洗涤一次；
7. 用 50 µl RNase-Free Water 洗脱 RNA；
8. 在微量紫外分光光度计上测量 RNA 的浓度；
9. 琼脂糖凝胶电泳；
10.逆转录制备 cDNA；
11.取 5 μl cDNA 模板进行 RT-PCR 检测。

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