P388D1 小鼠淋巴样瘤细胞使用说明书
细胞名称P388D1 小鼠淋巴样瘤细胞
货号ZQ 0143
描述这株细胞的一个亚株生成高水平的白介 1(IL-1, interleukin 1)。检测表明肢骨发育畸形
病毒(鼠痘)阴性。在本库通过支原体检测。
种属小鼠
组织来源淋巴瘤
形态淋巴母细胞
生长方式悬浮
安全性所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操
作,并请注意防护
培养推荐自配培养基:RPMI-1640( 货号:ZQ-200)+10%马血清+1%PS
(sciencell 货号:0513)
配套完全培养基:RPMI-1640 完全培养基(中乔新舟 货号:ZQ-209) 温度:37℃
气相:95%空气,5%二氧化碳
传代收到细胞后,请对细胞培养瓶外表进行消毒,将细胞置于培养箱中进行 1-2 小时的缓冲,待其恢复细胞基本生长状态后,将整瓶细胞及培养液分批离心并换液(换液步骤如下),待细胞长至 85-90%传代。
1,用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,若培养瓶上无特殊标注,以 1000rmp 5min 将所有细胞悬液分别离心后收集于离心管中,待用;半悬浮细胞,悬浮的细胞操作同上,贴壁的细胞用 PBS 洗一遍,加入 1ml 稀释三到四倍的胰酶消化至轻拍甁壁呈流沙样脱落,终止消化。
2,根据离心后的细胞量进行放回培养或分瓶培养,培养时瓶子平躺,培养液 6-8ml;
3,换液周期一般 2-3 天一次,换液时将所有细胞培养液 1000rmp 5mi 离心;
4,如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代比例为 1:2,培养液必须常温。
注:1.观察细胞密度最好用(4X 物镜)低倍镜观察,以便正确的判断细胞密度;观察细胞形态请用(10X 或 20X)高倍镜观察;
2.瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养;
3.对于生长时容易聚团的悬浮细胞,若轻拍瓶壁,不能拍散,可将细胞悬液离心后, 用 PBS 重悬,再次离心后用稀释三到四倍的胰酶消化,将聚团细胞消化成单个细胞4.收到细胞后,若发现培养瓶破损、漏液及细胞污染,请及时与我们联系。
保存冻存条件:70%基础培养液+20%胎牛血清+10%DMSO
保存条件:液氮存储
供应限制经供研究之用
常见问题及解决方案1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2 小时后观察,
如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留 8-10ml
培养液培养观察,细胞生长至汇合度 80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细
胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

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