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技术文章
P388D1 小鼠淋巴样瘤细胞 使用说明书
点击次数：3763 发布时间：2019/6/10 8:36:17
P388D1 小鼠淋巴样瘤细胞
使用说明书
细胞名称P388D1 小鼠淋巴样瘤细胞
货号ZQ 0143
描述这株细胞的一个亚株生成高水平的白介 1(IL-1, interleukin 1)。检测表明肢骨发育畸形
病毒(鼠痘)阴性。在本库通过支原体检测。
种属小鼠
组织来源淋巴瘤
形态淋巴母细胞
生长方式悬浮
安全性所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操
作，并请注意防护
培养推荐自配培养基：RPMI-1640（ 货号：ZQ-200）+10%马血清+1%PS
（sciencell 货号：0513）
配套完全培养基：RPMI-1640 完全培养基（中乔新舟 货号：ZQ-209） 温度：37℃
气相：95%空气，5%二氧化碳
传代收到细胞后，请对细胞培养瓶外表进行消毒，将细胞置于培养箱中进行 1-2 小时的缓冲，待其恢复细胞基本生长状态后，将整瓶细胞及培养液分批离心并换液(换液步骤如下)，待细胞长至 85-90%传代。
1，用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，若培养瓶上无特殊标注，以 1000rmp 5min 将所有细胞悬液分别离心后收集于离心管中，待用；半悬浮细胞，悬浮的细胞操作同上，贴壁的细胞用 PBS 洗一遍，加入 1ml 稀释三到四倍的胰酶消化至轻拍甁壁呈流沙样脱落，终止消化。
2，根据离心后的细胞量进行放回培养或分瓶培养，培养时瓶子平躺，培养液 6-8ml；
3，换液周期一般 2-3 天一次，换液时将所有细胞培养液 1000rmp 5mi 离心；
4，如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代比例为 1:2，培养液必须常温。
注：1.观察细胞密度最好用（4X 物镜）低倍镜观察，以便正确的判断细胞密度；观察细胞形态请用（10X 或 20X）高倍镜观察；
2.瓶中运输的培养液不能重复使用，请换新鲜培养液培养；
3.对于生长时容易聚团的悬浮细胞，若轻拍瓶壁，不能拍散，可将细胞悬液离心后， 用 PBS 重悬，再次离心后用稀释三到四倍的胰酶消化，将聚团细胞消化成单个细胞4.收到细胞后，若发现培养瓶破损、漏液及细胞污染，请及时与我们联系。
保存冻存条件：70%基础培养液+20%胎牛血清+10%DMSO
保存条件：液氮存储
供应限制经供研究之用
常见问题及解决方案1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。
2.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2 小时后观察，
如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留 8-10ml
培养液培养观察，细胞生长至汇合度 80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细
胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
