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细胞爬片的免疫荧光步骤的分析

提供者：上海谷研生物科技有限公司发布时间：2017/9/19 9:35:18 阅读次数：568次进入该公司店铺

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实验室所做的大部分细胞爬片的免疫荧光步骤基本一致：

1.取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。

注意：有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心，注意反正面，放在皿里洗比较方便，避免了来回夹取，另外洗的时候加PBS不要太冲，不要细胞冲下来。洗的时候我都是多加PBS，稍晃一下就倒掉，没有等5分钟或10分钟。

2. 4％冷的多聚甲醛固定20分钟，PBS洗三遍。

3. 0.2％Triton X－100通透10分钟，PBS洗三遍。

4. 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟，PBS洗三遍。

5. 一抗4度湿盒内过夜，也可37度2小时，感觉前者效果好，PBS洗三遍。

6.二抗室温2小时（避光），或者37度1半小时，PBS洗三遍。

7.用DAPI染核，然后直接照荧光片。

8.蒸馏水洗掉PBS，甘油封片，指甲油封片子的四周，因为甘油不象树脂那样会干，所以不用指甲油封的话会弄的一塌糊涂。

Multi-class antibodiesAnti-mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗体规格： 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-mucin4/Muc4(human) 粘蛋白-4抗体规格： 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-MuRF1/Trim63 肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1抗体规格： 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-MyD88 髓样分化蛋白抗体规格： 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-NIPP1/ARD1 核抑制蛋白磷酸酶1抗体规格： 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗体规格： 0.1ml

Multi-class antibodiesAnti-PMP2 周围神经髓鞘蛋白2抗体规格： 0.2ml

Multi-class antibodiesAnti-MYSM1 MYSM1抗体规格： 0.2ml

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关键词：细胞

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